集胞藻Synechocystis spPCC6803溶血素的分离纯化和初步鉴定.pdfVIP

S-300 SephacrylHighResolution凝胶过滤层析和羟基磷灰石层析等步骤进行了分 离纯化，也获得了分子量为81kDa的蛋白质，但通过溶血实验检测不到明显的 溶血活性。我们推测有可能是因为集胞藻6803 wT菌株的溶血素在细胞内以无 活性的形式存在，只有分泌到细胞外，经过某种构象变化或修饰之后才会形成具 有活性的形式。 改变培养基的组成，对集胞藻6803溶血素的分泌有较大影响。培养基中不 同浓度的Ca2+对集胞藻6803细胞的生长无显著影响，但在不含ca：2+的培养基中 生长的集胞藻6803仅有极低的溶血活性，SDS．PAGE结果也几乎看不到溶血素 于对照(0．24mMca2+)，说明溶血素的分泌对培养基中的Ca2+存在依赖性。当培 养基中缺乏K、P元素或未逶无菌空气培养时，集胞藻6803的生长和溶血活性 都显著降低，溶血活性的降低的原因可能是细胞数量的减少导致溶血素分泌量的 Mn2+、Fe3+时，对藻细胞生长并无明显影响，但溶血 减少。培养基中添加109M 活性显著受到抑制。培养基中添加1．0--100pM氯霉素(蛋自质合成抑制剂或 叠氮钠(能量代谢抑制剂)时，均显著抑制集胞藻6803的生长和溶血活性，也 说明该溶血素可能是一种从头合成的蛋白质。 关键词：集胞藻6803；溶血素；溶血活性；分离纯化：ca2+ ll Purificationand characterizationofa partial hemolysin from strain 6803 wild-typeofSynechocystissp．PCC Abstract 6803isawide-usedmodel for and Synechocystissp．PCC organismgenetic research．nleentire of has been the photosynthetic genomecyanobacteriumalready homologic thatthereare17 relatedwi血 sequenced．DNAanalysissuggests genes ofwhich10 encode or to hemolysin genes hemolysinhemolysin，likeproteins．Up ofthe ofthese hasbeen andcharacterized now,none products genes purified except forthatofSlll951，which showesnohemolyticactivityagainst the harmful of 6803onenvironmenthasnot potential impactSynechDcl咖sp．PCC been comfirmedandconsidered．Inthe oftheNationalNaturalScience fully support FundofChiunand Provincial