茶树细胞周期蛋白依赖激酶（CsCDK）基因cDNA全长克隆与分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2012 ，39 （2 ）：333 –342 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 茶树细胞周期蛋白依赖激酶 （CsCDK ）基因 cDNA 全长克隆与分析 * 王新超，马春雷，杨亚军 ，金基强，马建强，曹红利 （中国农业科学院茶叶研究所/国家茶树改良中心，杭州 310008 ） 摘 要：采用 SMART-RACE-PCR 技术获得了茶树细胞周期蛋白依赖激酶基因（CsCDK1 ）的全长 cDNA 序列，并进行了相关的生物信息学分析。采用实时定量 PCR 研究了该基因在茶树越冬芽休眠到萌 发后不同阶段的表达模式。克隆到茶树 CsCDK1 cDNA 序列 1 245 bp （GenBank 登录号 JF449383 ），其开 放阅读框长 924 bp，编码 307 个氨基酸，预测分子量为 34.52 kD，具有 CDKs 家族典型的保守结构域和 空间结构，属于 B 型 CDK 家族。系统进化分析表明，CsCDK1 氨基酸序列与猕猴桃的 CDK 亲缘关系最 近，达到 96%，与其它植物的 CDK 序列相似性亦在 80% 以上。该基因在茶树越冬芽休眠期的表达量低于 恢复生长期，在萌发期表达量最高。说明该基因与茶树越冬芽休眠的解除关系密切。 关键词：茶树；芽；萌发；细胞周期蛋白依赖激酶基因；表达分析 中图分类号：S 571.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2012 ）02-0333-10 cDNA Cloning and Expression Analysis of Cyclin-dependent Kinase （CsCDK ）Gene in Tea Plant * WANG Xin-chao ，MA Chun-lei ，YANG Ya-jun ，JIN Ji-qiang ，MA Jian-qiang ，and CAO Hong-li （Tea Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences；National Center for Tea Improvement ，Hangzhou 310008，China ） Abstract ：The full length cDNA sequence of cyclin-dependent kinase gene was cloned by SMART- RACE-PCR from tea plant （Camellia sinensis L. ），which was named as CsCDK1（GenBank Accession No. JF449383 ）. Its expression pattern during the time of bud dormancy and bud break in tea plant was analyzed by quantitative real-time PCR （qRT-PCR ）. The full length cDNA of CsCDK1 is 1 245 bp，which includes 924 bp complete CDS and encodes 307 amino acid residues with a putative molecular mass of 34.52 kD. The bioinformatics characterization indicated that the protein encoded by CsCDK1 gene has a typically conserved