荷花基因耐盐性在转化烟草中的验证.pdfVIP

园 艺 学 报 2012 ，39 （2 ）：323 –332 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 荷花 NnNHX1 基因耐盐性在转化烟草中的验证 郭会敏，顾春笋，陈发棣，徐迎春，刘兆磊* （南京农业大学园艺学院，南京 210095 ） + + 摘 要：为研究荷花液泡膜型 Na /H 逆向转运蛋白基因 NnNHX1 的耐盐性，构建了植物表达载体 pCAMBIA1301-220-NnNHX1 ，并通过农杆菌介导的叶盘转化法将 NnNHX1 基因转入烟草。利用荧光定量 PCR 分析 NnNHX1 在转基因烟草中的表达情况。对转基因烟草进行盐胁迫试验，并测定其在盐胁迫条件下 叶绿素、脯氨酸和丙二醛含量、相对电导率、SOD 和 POD 活性等相关生理指标及后代种子的发芽率。结 果显示，在获得的 7 个转 NnNHX1 基因烟草株系中，T-N1 、T-N2 和 T-N10 等 3 个株系 NnNHX1 表达量较 高。盐胁迫下，转基因烟草组培苗和盆栽苗的生长状况都好于对照植株，在叶绿素含量、脯氨酸含量、细 胞质膜的完整性（相对电导率和丙二醛含量）和抗氧化酶（SOD 和 POD ）活性等方面都好于对照，并且后 代种子的发芽率也明显高于对照。表明荷花 NnNHX1 基因能够在烟草中正常翻译和表达，NnNHX1 的过量 表达提高了转基因烟草的耐盐性。 关键词：荷花；NnNHX1 基因；转基因；烟草；耐盐性 中图分类号：S 682.32 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2012 ）02-0323-10 Salt Tolerance Verification of Lotus NnNHX1 in Transformed Tobacco * GUO Hui-min，GU Chun-sun，CHEN Fa-di，XU Ying-chun ，and LIU Zhao-lei （College of Horticulture，Nanjing Agricultural University ，Nanjing 210095 ，China） + + Abstract ：To study the salt tolerance of tobacco plants transformed with lotus vacuolar Na /H antiporter gene NnNHX1 ，a plant expression vector pCAMBIA1301-220-NnNHX1 was constructed and then was transformed into wild Nicotiana tabacum by Agrobacterium -mediated leaf disc transformation. The expression of NnNHX1 in transgenic tobacco was detected by quantitative PCR analysis. Salt stress test on transgenic tobacco and then the chlorophyll ，proline and MDA content ，relative conductivity ，SOD， POD and other phy