甘蓝Ogura 细胞质雄性不育相关基因MF1启动子的克隆及功能分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2013 ，40 （5 ）：887 –895 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 甘蓝 Ogura 细胞质雄性不育相关基因 BoMF1 启动子的克隆及功能分析 1,2 1 2 1,* 2,* 郭盈盈 ，颉建明 ，简元才 ，郁继华 ，康俊根 1 2 （甘肃农业大学农学院，兰州 730070 ； 北京市农林科学院蔬菜研究中心，农业部华北地区园艺作物生物学与种质 创制重点实验室，北京 100097 ） 摘 要：通过 TAIL-PCR 染色体步移技术，从甘蓝（Brassica oleracea L. var. capitata L. ）基因组中克 隆到胞质雄性不育（OguCMS ）相关基因BoMF1 翻译起始位点上游 521 bp 的启动子序列。软件分析预测 表明，该启动子序列中存在多个顺式作用元件，包括 TATA-box 、CAAT-box、MYB 结合位点、植物激 素响应单元等。为了研究该启动子的表达特性，亚克隆了 BoMF1 转录起始位点上游 521 bp 序列，将其置 换 pBI121 中的CaMV35S 启动子，驱动其下游的 GUS 基因，构建植物表达载体 pBI121-BoMF1P ，以pBI121 空载体作为阳性对照，通过农杆菌（LBA4404 ）介导法转入拟南芥。结果表明，甘蓝BoMF1 启动子序列 能驱动 GUS 基因在拟南芥花药发育晚期的花药和花粉中特异表达，表达具有组织特异性。 关键词：甘蓝；OguCMS ；BoMF1 启动子；GUS；调控元件 中图分类号：S 635.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2013 ）05-0887-09 Cloning and Functional Analysis of OguCMS-related Gene BoMF1 Promoter in Brassica oleracea 1,2 1 2 1,* 2,* GUO Ying-ying ，XIE Jian-ming ，JIAN Yuan-cai ，YU Ji-hua ，and KANG Jun-gen 1 2 （Gansu Agriculture University，Lanzhou 730070 ，China； Beijing Vegetable Research Center ，Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences ，Key Laboratory of Biology and Genetic Improvement of Horticultural Crops （North China），Ministry of Agriculture ，Beijing 100097 ，China） （ ） Abstract ：The regulative sequence 521 bp of OguCMS-related gene BoMF1 promoter from Brassica oleracea