天麻钩藤方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马细胞外液氨基酸递质的影响论文.pdfVIP

天麻钩藤方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马细胞外液 氨基酸递质的影响* 1 1 2 3 2 2 2 张春颖 杜贵友 王巍 叶祖光 王丹巧 孙晓芳 赵德忠 (1) 中国中医研究院中药研究所 北京 100700 (2) 中国中医研究院西苑医院 北京 100091 (3) 中国中医研究院 北京 100700 [摘要] 目的 观察天麻钩藤方 天钩方 对不完全脑缺血清醒自由活动大鼠海马细胞外氨基酸类 递质的影响 方法 用双侧颈总动脉结扎的方法制成清醒自由活动SD 大鼠脑不完全缺血模型 用 CMA 微透析系统收集缺血前 缺血期间及再灌后不同时间段的海马细胞外液 用高效液相色 谱- 电化学方检测器测定各试验组透析液中谷氨酸 Glu 牛磺酸 Tau 精氨酸 Arg -氨 基丁酸 GABA 和半胱氨酸 Cys 的水平 结果 与假手术组比较 缺血120 min 时 不完全 脑缺血大鼠海马细胞外液中Glu Cys GABA Tau 和Arg 分别为基础水平的294.2% (P0.001) 497.5% (P0.001) 310.9% (P0.001) 180.8% (P0.001)和39.8% (P0.001) 再灌120 min 时 Glu GABA 和Tau 分别为假手术组的146.4% (P0.001) 225.0% (P0.001)和 110.3% (P0.001) 与模型组比较 缺血120 min 时 天钩方小 中和大剂量组Glu 和Cys 的均显著降低 P0.05 Tau GABA 和Arg 均显著升高 P0.05 再灌120 min 时 天钩方小 中和大剂量组的Glu 显 著降低 P0.05 GABA 和 Tau 显著升高 P0.05 结论 天钩方能降低不完全脑缺血时大鼠 海马细胞外液Glu 和Cys 的升高幅度 减少Arg 的降低幅度 并增加GABA 和Tau 的升高幅度 并降低再灌后海马细胞外液Glu 的水平 升高GABA 和Tau 的水平 从而发挥神经保护作用 [关键词] 天麻钩藤方 脑缺血 海马 微透析 氨基酸 脑血管病是老年人易患的常见病 随着我国人口老龄化社会的到来 呈上升趋势 临床观察 结果表明 脑血管病是导致老年性痴呆的主要原因 老年性痴呆中以血管性痴呆 vascular dementia VD 为多见 由于临床治疗缺乏理想的药物 中药治疗VD 成为这一领域的一个新课 题 天麻钩藤方 天钩方 是以天麻钩藤饮化裁而成 具有平肝息风 清热活血和补肾益智 之功效 基础研究表明有改善脑缺血再灌注动物的学习记忆障碍作用 临床研究表明可提高肝阳 [1] 上亢型脑血管性老年痴呆患者的智力和痴呆量表分值 我们通过结扎双侧颈总动脉造成清醒自 由活动大鼠的不完全脑缺血模型,用微透析技术实时采集大鼠海马细胞外液(extracellular fluid, *本课题由国家自然科学基金资助 编号 1 ECF) 观察天钩方对大鼠海马 ECF 中氨基酸递质的影响 进一步研究天钩方治疗血管性痴呆的 作用机理 1. 材料 1.1 仪器 高效液相色谱系统 CMA/260 除气装置 BAS 的PM-80 泵 CC-5 液相色谱装 置 Rheodyne7125 注入阀 Nucleosil C 18 柱 100mm 3.0mm 3 m 玻璃碳工作电极和Ag/AgCl 参考电极 LC-4C 电化学检测器(electrochemical detector, ECD) 和色谱工作站 微透析装置