天门冬氨酸氨基转移酶生物传感器响应特性研究论文.pdfVIP

天门冬氨酸氨基转移酶生物传感器响应特性研究冰 姜利英1’2蔡新霞1 郭宗慧10刘春秀1·2李华清1·2 1．中国科学院电子学研究所传感技术国家重点实验室 北京2652信箱9室邮编 100080 2．中国科学院研究生院北京 ： 摘要：本文介绍了基于电流法的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)生物传感器的反应原理、制备方法和 临床质控血清测试结果，在传感器电极表面固定redox-polymer薄膜，AST在辅助因子的协同作用下， 将天冬氨酸转化为谷氨酸和草酰乙酸，谷氨酸直接与谷氨酸氧化酶反应，生成的过氧化氢与AST的活 力戍正比关系，借助检测反应最终产物过氧化氢的氧化电流，得到AST的活力值．该传感器对AST质 控血清检测的相关系数R为O．99，精密度CV为5．49％．本传感器将用于临床心脏功能监测和运动员运 动机能评定． 关键词：天门冬氨酸氨基转移酶rcdox-polymcr电流法生物传感器 1．引言 在雅典奥运会上，我国健儿奋力拼搏，取得了令世界瞩目的好成绩，这之中除了运动员的辛勤汗水外， 科学的训练方法也是其中要素。在运动训练中，合理运用基础理论、医务监督、控制训练负荷、判断运动性 疲劳、防止过度疲劳和运动损伤的发生，以及有效的挖掘人体的运动潜力、提高竞技能力，均有十分重要的 意义，并已经成为科学训练的重要内容。天门冬氨酸氨基转移酶(ASD即为需重点监测的参数之一，该酶广 泛分布在人体各组织器官内。在心脏等脏器受损时，细胞内酶释入血液，使血清内酶的活性提高。因此，在 训练中常用此酶作为判定心脏组织是否受损的重要指标。对运动员训练疲劳程度的监控，进而调整改 进训练计划有重大的意义，而且该方法可以为运动员选材提供简便、快速和廉价的手段，使之更具有 实用价值。 同时它还可用作心脏功能评定的指标，对于多种心脏疾病的早期预警有着不可替代的作用。随着社会的 发展。患有心脑血管疾病的人数急剧上升，因此定期的心脏功能检查也变得越来越重要。可见天门冬氨酸氨 基转移酶(AST)检测的临床意义也十分巨大。【1．2】 2．实验部分 2．1实验用试剂 X-100(北京化学试 RC一59l 剂公司)、AVICEL 醛)(sigma公司，美国)、AST(Signm公司，美国) 2．2传感器制作 为了获得低浓度待测物质的小信号响应，考虑使用经典三电极，即互相独立的对电极、工作电极、参比 mm一2 mm-2．5 电极(C．w-R)。电极材料采用金。电极尺寸为2．5 nun(c-w-R)。为了提高电极活性．降低背景 电流，使用了一种新型的氧化还原聚合物——剥ox polymer。为了消除电极在干燥过程中发生的凝聚现象， 使得加入待测试剂后能在最短时间恢复干燥前液相，获得更为稳定的反应过程，提高信号的一致性和测量灵 ·本文由舀家高技术研究发展计勤j项目(编号：2004Mt404020)、国家自然科学基金项目(编号、中嗣科学院电子学研究所知识 创新工程领域前沿项目(KGCX2-SW-602-2)资助． 385 X．100。在试剂中再加入由若干种纤维素组成的流变改性剂， 敏度，在试剂中加入提高表面活性的TRITON 有利于酶的固定化，使酶在电极表面形成一层均匀的薄膜。 取新溅射的薄膜电极，切割成小片，使用等离子刻蚀机进行清洗。在清洗好的电极上粘贴双面胶沟道。 形成电极反应区。再将polymer试剂滴加到工作电极上，使之均匀铺开。将滴加好的电极置于阴凉避光处 晾干。传感器外形如图l所示。 2．3工作原理 采用电化学电介质法：在固定化酶膜与电极之间还固定有一层电介质膜，固定在工作电极上的 氧化酶将底物进行氧化，生成具有氧