7 第七讲(2 )植物组培操作技术.ppt

灭菌室的设置及配备 灭菌方法 高温湿热灭菌 干热灭菌 过滤灭菌 化学灭菌 紫外灭菌 多数细菌和真菌的营养细胞在60℃左右处理15min后即可杀死。 酵母菌和真菌的胞子要耐热些，要用80℃以上的温度处理才能杀死。 细菌的芽胞更耐热，一般要在120℃下处理15min才能杀死。 高压湿热灭菌 121℃，0.105MPa ，20min 湿热灭菌法比干热灭菌法更有效。在相同温度下，湿热的效力比干热灭菌好的原因是： ①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键，更易使蛋白质变性。 ②热蒸汽比热空气穿透力强，能更加有效地杀灭微生物。 接种室的灭菌 接种室的设置和配备 超净工作台的灭菌 1、擦工作台面 2、开风机，打开紫外灯20min以上 3、用75%酒精洗工作台面 接种器皿、用具的灭菌 用具先用95%酒精浸泡，后于酒精灯外焰灼烧 防止空气污染 接种时在近火焰处打开瓶口，使瓶倾斜，以免空气中微生物落入瓶中 防止操作带来的污染 A、整个接种操作 动作要迅速 B、接种过程中尽可能达到悬空要求 C、接种时不得用手接触瓶盖内壁或瓶口 D、瓶盖朝上放，接种完毕后立即盖好瓶口 分布均匀 外植体必须与培养基紧密接触，且在培养容器内均匀分布，以保证营养的充分利用，以