《食品安全国家标准 食品中氨基甲酸乙酯的测定》编制说明.docVIP

《食品安全国家标准 食品中氨基甲酸乙酯的测定》 编制说明 一、标准起草的基本情况（包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人） 1、根据卫生部办公室关于印发《2011年食品安全国家标准制（修）订项目计划》的通知（卫办监督函[2011]668号）要求，浙江省疾病预防控制中心承担了《食品中氨基甲酸乙酯的测定》国家标准的制定工作，项目编号为spaq-2011-54。符合我国国情，方便快速，同时与AOAC方法接轨编写检测机构通过广泛征求意见，标准的科学性和可操作性 2、标准起草单位：浙江省疾病预防控制中心 3、主要起草人：吴平谷沈向红王立媛张 晶赵永信潘晓东谭 莹应 英 1、条件的确定 .1 色谱柱的选择 AOAC 994.07采用DB-INNOWAX柱，SN/T0285-1993采用HP-20M色谱柱，《食品化学污染物及有害因素监测手册》中采用DB-INNOWAX柱，这几种色谱柱均属于极性柱，且填料均为PEG20M。因此本标准规定为DB-INNOWAX毛细管色谱柱(填料为PEG20M)：30 m×0.25 mm（内径）×0.25 μm（膜厚）或相当色谱柱。 2.2 气相色谱条件的选择酒及酱油中含有较多挥发性化合物，特别是酯类化合物对氨基甲酸乙酯的测定有一定干扰，氨基甲酸乙酯属于小分子化合物（分子量为89），测定时容易受其他化合物干扰，通过本标准升温模式可以获得较好分离效果，在该条件下，目标化合物的保留时间为12min-14min之间。 2.3 内标的选择食品中氨基甲酸乙酯的测定使用的内标有氨基甲酸丙酯、氨基甲酸丁酯、D5-氨基甲酸乙酯等。考虑到内标物与目标化合物性质越相近越好，且同位素内标稀释法越来越多地用在微量化合物的检测，D5-氨基甲酸乙酯价格也可以接受，因此本标准采用D5-氨基甲酸乙酯作为内标。 2.4 质谱条件的确定选择氨基甲酸乙酯的44、62、74、89m/z和D5-氨基甲酸乙酯64、76m/z为定性离子，根据质谱定性检测要求、离子强度、样品测定抗干扰性，分别选择62、64作为氨基甲酸乙酯和D5-氨基甲酸乙酯的定量离子。 2.5 标准曲线氨基甲酸乙酯在10μg/L-1000μg/L，其浓度与氨基甲酸酯峰面积与内标峰面积的比值（以比值62/64表示）Y=0.0043X+0.0363, R2=0.9984。因不同样品中氨基甲酸乙酯含量相差很大，可根据其氨基甲酸乙酯浓度，选择合适的标准曲线范围，建议低浓度选择10μg/L-200μg/L，高浓度选用50μg/L-1000μg/L浓度范围内的标准曲线计算样品中氨基甲酸乙酯的含量。 3、样品前处理条件的确定 3.1固相萃取柱的选择及净化条件的优化：本标准采用4000mg/12mL的碱性硅藻土柱进行样品净化，碱性硅藻土柱可以除去样品中大量酸性化合物（如乙酸、乳酸等）。样品中添加0.3g氯化钠（基本达到饱和）提高氨基甲酸乙酯回收率（酱油含有氯化钠，不需要添加氯化钠），样品上柱后，用10mL正己烷淋洗，除去酒样中烷烃等干扰物。 3.2洗脱液的选择：分别用二氯甲烷、乙醚及5%乙酸乙酯/乙醚3种溶剂进行洗脱，以D5-氨基甲酸乙酯绝对回收率为指标，其平均回收率分别是71.8%、70.1%、80.2%，本方法采用5%乙酸乙酯/乙醚作为固相萃取洗脱液，洗脱体积为10mL。 4、方法的精密度和准确度 4.1 精密度啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒、酱油样品进行日内和日间平行测定，结果日内精密度啤酒、酱油等低浓度样品相对标准偏差（RSD）为9.1%和11.5%，其余样品相对标准偏差（RSD）在1.1%～8.3%之间，符合方法学的要求。日间相对标准偏差范围3.8%～6.4%,。其精密度符合方法学的要求 4.2 准确度：对啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒、酱油进行氨基甲酸乙酯加标试验，每类样品添加3～4个浓度水平。结果啤酒回收率为72.5%～111.3%，平均回收率92.3%；葡萄酒回收率74.2%～113.3%，平均回收率94.5%；黄酒回收率82.6%～101.7%，平均回收率89.7 %；白酒回收率75.9%～107.0%，平均回收率92.4%；酱油回收率96.8%～109.0%，平均回收率为102.2%。 5、方法检出限及定量限 根据仪器灵敏度和3倍信噪比，方法检出限为2.0μg/kg，选择5种不同基质的低浓度样品加标5.0μg/kg，结果5种基质的样品回收率在84.0%～114.%之间，,RSD在5.5%～7.7%之间，故确定本方法定量限为5.0μg/kg。 6、样品测定 本方法已用于国家食品安全风险监测中白酒、葡萄酒、黄酒中氨基甲酸乙酯的监测，也进行酱油和黄酒生产过程中氨基甲酸乙酯形成进行的过程性监测。其典型样品谱图见图1、2。 图1 葡萄酒中氨基甲酸乙酯的总离子流图  图2 黄酒中氨基甲酸乙酯的总离子流图