一株植物乳杆菌生物学特性的研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物徽生态学分会第三届第八次学术研讨会论文集 (2006年广州) 一株植物乳杆菌生物学特性的研究 黄怡I，王士长i，刘金萍2 1.广西大学动物科技学院，广西南宁530005;2.广东省农业科学院兽医研究所，广东广州 510500 益生素是一种微生物制剂，给畜禽饲喂益生素的目的是使有益的微生物在其肠道中大量繁殖， 成为优势菌，从而抑制肠道中的病原菌生长，维持肠道健康状态，促进肠道消化功能的提高，有利 于提高饲料的转化率，最大限度地发挥畜禽的生产性能。在实际生产中益生素最简便有效的使用方 法是按一定量添加到配合饲料中饲喂动物，这就要求益生素生产菌必须能经受得住饲料生产、贮存、 运输以及动物采食、消化等过程的高温、高压、胃酸、饲料中添加的药物等种种因素的考验，活着 到达动物肠道才能发挥正常功能，这是筛选益生素生产菌时必须考虑的因素。我们从发酵木薯中分 离到一株植物乳杆菌，并模拟以上各种因素对其活力的影响，为推广应用这一菌株提供依据。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种:植物乳杆菌 (N3)，由广西大学动物科技学院动物营养研究室提供. 1.1.2培养基:5号培养基。 1.1.3主要试剂:人工胃液，参照中国药典1978年第二部的方法配制。 1.2方法 1.2.1对温度耐受能力的浏定 取24支相同规格的试管，在每支试管中加入等量的5号液体培养基，并接种等量同浓度的植物 乳杆菌 (N3)菌液，分别置于371C(对照组)、60C、650C、701C,750C,800C,850C,900C水浴 中(每个温度梯度设三个重复)，10min后取出，立即用流动的自来水冷却至室温 (对照组除外)， 再置于37℃恒温箱培养24h后取出，根据范秀容等 (1989)的方法测定各管液体的OD42。值。。 1.2.2对蒸汽压力耐受能力的测定 一般颗粒饲料制粒时的蒸汽压力为0.20Kg/cm2。取已知浓度的植物乳杆菌(N3)菌液，置于 0.20Kg/cm的蒸汽压力下，10min后取出，立即用流动的自来水冷却至室温，经无菌生理盐水倍比 稀释后，用平板涂布法接种于平板上，置于37℃恒温箱培养24h后进行活菌数量统计。 1.2.3分解沈粉生成乳酸能力的测定 称取可溶性淀粉和玉米粉各45g，加水调整湿度至65%，在每克底物中添加109个活的植物乳杆 菌，放入37℃培养箱分别培养36h和48h后用高效液相色谱法分别测定其中乳酸的含量，并计算乳 酸产率 (%)=乳酸产量 (留100m1)/(100%一湿度). 1.2.4对酸的耐受能力的测定 用稀盐酸调整培养基的pH值，以0.85%无菌生理盐水作对照组。取相同浓度的植物乳杆菌(N3) 菌液Iml，分别加入9ml各梯度pH值的培养基中，置于37℃培养箱培养60min后用平板菌落计数 法进行活菌数量的统计，并计算植物乳杆菌的耐过率， 1.2.5对人工胃液耐受能力的测定 分别用人工胃液和0.85%的无菌生理盐水 (对照组)将植物乳杆菌 (N3)菌液进行倍比稀释，’2 小时后，分别取50,110-5_10-7(人工胃液)和10-g-1010(生理盐水)稀释液接种于5号固体培养基 平板上，(各稀释度设3个重复)，37℃有氧培养24小时后进行菌落计数。 1.2.6对常用药物敏感性的测定 :采用圆滤纸片法。 *通讯作者E-mail:wangshichang200l2001@;第一作者E-mail:huangyi@ 中国畜牧善医学会动物微生态学分会第三届第八次学术研讨会论文集 (2006年广州) 2结果与讨论 2.1植物乳杆菌(N3)对温度和蒸汽压力(0.20Kg/cm2)的耐受能力 表1-1 植物乳杆菌 (N3)对温度的耐受能力 Table1一1 EffectoftemperatureonthegrowthofLplantarumN3 温度℃ 60 65 70 75 80 85 90 OD42。值 0.415 0.39 0.381 0.36 0.342 31 0.221 0.018 表 1-2植物乳杆菌 (N3)对高压的耐受性 Tablel-2 ThetoleranceofL.plantar