鸭乙型肝炎病毒感染天府肉鸭病理模型的初步研究.pdfVIP

禽类传染病 注:食道、气管处的对数位为整段食道和气管内的含1,咽喉拭子处的对数值为整个拭子的含黄. 出RA，说明在感染后2h，各感染途径均不能引起脾脏、法氏囊的免疫反应。 三种途径中，滴鼻组是RA到达鸭体内各组织器官速度最快的途径，除免疫器官(胸腺、 法氏囊、脾)外，RA含量均是三种接种途径中最高的，说明滴鼻感染是RA感染雏鸭的最 佳途径;皮注组RA到达各器官的速度晚于滴鼻组，但RA含量在免疫器官中是最高的，其 它器官中均低于滴鼻组，说明皮注感染容易引起鸭体的免疫反应;口服组RA到达各器官的 速度最慢，RA在脑、胰、直肠中的含量高于皮注组，但低于滴鼻组，其它器官RA的含量， 口服组均最低，说明口服感染的效果明显低于滴算组和皮注组。 参考文献略 鸭乙型肝炎病毒感染天府肉鸭病理模型的初步研究 徐大为”，程安春’2，汪铭书’2，陈宗艳’2 (四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心，四川，推安，625014;2.动物疫病与人类健康 四川省重点实验室，四川，雅安，625014) 摘 要:目的:探索和建立鸭乙型肝炎病毒((DuckhepatitisBvirus,DHBV)人工感染天府肉鸭的病理感染模 型.方法:用DHBV阳性血清经不同途径 (静脉注射、腹腔注射和肝内注射)人工感染1日龄天府肉鸭后， 分别于感染后2d,4d,6d,8d,10d,12d,14d,i6d,19d,22d,26d.31d,37d,44d.52d,60d,70d 杀鸭取血和肝组织，用荧光定贵聚合醉链反应(fluorsescencequantitativepolymerasechainreaction,FQ-PCR) 方法检测，对不同感染途径进行比较.结果:感染48h后均可从各组外周血和肝组织中检测出DHBVDNA, 到70天仍可检测出较高水平的DHBVDNA.感染后第10天到31天肝内和铃脉注射组外周血中DHBV-DNA的 拷贝数都保持在LOOX109以上;感染后第4天到44天，肝内注射组肝组织中DHBVDNA的拷贝数都保持在 100x1010以上，而静脉和腹腔注射组只有从第10天到22天肝组织中DHBV-DNA含t才保持在这一水平. 结论:天府肉鸭时DHBV敏感，用DHBV阳性血清感染1日龄天府肉鸭可建立DHBV病理感染模型，该模型 可用于抗乙型肝炎病毒((hepatitisBvirus,HBV)药物的筛选和评价. 关钮词:鸭乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 荧光定全PCR 动物模型 天府肉鸭 *程安春和汪铭书为通讯作者 DHBV是禽嗜肝DNA病毒属(Avihepadnavirus)的代表种，其形态结构、核酸组成、生 物学特性、发病机理和相对嗜肝性等与HBV很相似，感染后都可引起急、慢性肝炎，肝硬 化等[1l。利用DHBV感染雏鸭后，检测其血清或肝组织中DHBV-DNA被抑制情况作为评 价抗HBV药物药效的动物模型已被公认[U。用该模型可以提供一个与人类HBV感染相近似 的体内实验系统[21，国外早己有采用DHBV动物模型评价抗HBV药物疗效的研究报道[[31 而评价抗HBV药物最重要、最直接的指标之一是用药后外周血和肝组织中DHBV-DNA 水平的变化;因此，DHBV感染鸭作为动物模型来筛选和验证中西药物抗HBV,需要对用 药前后DHBVDNA含量的进行定量检测、分析和研究[[1,41。但目前尚无全面的、详尽的用 DHBV多途径感染鸭后外周血和肝组织中DHBV-DNA的动态变化规律的具体报道。本试 验旨用DHBV阳性血清经静脉、腹腔、肝内注射感染天府肉鸭后，通过FQ-PCR检测不同 日龄肝组织和外周血中DHBV-DNA的含量，探索和建立DHBV人工感染天府肉鸭的病理 模型，为筛选和评估抗HBV药物提供可靠的方法和研究手段。 1材料与方法 1.1病毒株 DHBVCH株 由四III农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室提供。 1.2 动物 1日龄天府肉鸭健雏300只，雌雄不拘，体重5015g，购自四川农业大学原种水禽养殖 场。于孵化当日分别经颈静脉无菌采血，分离血清，经FQ-PCR检测筛选出238只DHBV 阴性、体况基本一致的雏鸭供实验用。 第六届理事会第二次会议盆教学专业委员会2006年会议论文集 1.3 实验方法 将238只鸭随机分为四个组，即胫静脉注射组、腹腔注射组、肝内注射组和空白对照组;