从繁殖障碍猪分离的猪瘟病毒E2基因的克隆和序列分析.pdfVIP

子结构是有差异的。 根据33株CSFV流行株及参考毒株的序列分析结果，对应强毒单抗ELISA反应结果， A组毒株具备疫苗株抗原分子特征;D组毒株具备经典毒株抗原分子特征。而国际公认的经 典参考毒株Brescia不能融入任何一组.中国CSFV流行株的树状分枝中，说明Brescia株与中 国CSFV流行株分子特征相差较大。尽管国外学者采用Brescia株对CSFV毒力基因进行了 大量研究，但是全基因序列分析表明，Brescia株与我国的流行株和疫苗株同源性为89.4% 和85.8%。我国分子流行病学调查结果显示，Brescia株位于1.1亚群，是目前国际上流行极 不活跃的亚群，与之同属的仅有的儿个毒株之间的意大利、捷克、美国和波 兰的流行株，因此，Brescia不适合作为中国CSFV流行株分子流行病学、毒力及抗原表位 特性研究，在我国进行毒力基因研究应采用近年来活跃流行的具有本土特点的中国流行株和 猪瘟兔化弱毒疫苗株。 随着CSFVE2蛋白表位的定位及功能研究，认为抗原表位的相对位置、表位间的间隔 顺序和表位侧翼顺序对表位的功能发挥着至关重要的作用。Kosmidou.A等 (1995)用12株 E2单抗和11株EO单抗将126株CSFV的反应区分为21种不同的反应类型，表现为不同的 抗原型或亚型。利用CSFV作为抗原制备的单抗多半是针对E2蛋白的，大部分具有中和活 性的，而Kosmidou.A又采用12株特异单抗能识别大部分CSFV株，抗原位点均在E2上。 本研究中强毒单抗的强反应性特异位点761(G)和764(L)对强毒单抗的针对性是至关重 要的，但这2个位点所在区域是否是一个新的抗原表位，有待于进一步研究。崔治中等2〔1] 通过马立克病病毒的9个不同毒株对2个单抗的反应性及其38KD磷蛋白基因的序列分析， 确定了两个相叠的不同抗原表位特异性的氨基酸组成。 4组流行株氨基酸序列分别具有一致独特的位点差异规律:A组流行株氨基酸序列均与 保守序列有6个位点差异;B组流行株具有2个独特差异位点:761(G)和764(L);C组 流行株也具有2个独特差异位点:738(1)和779(V);D组的流行株具有3个独特差异位 点:709(P),738(T/1)和779(A/T/V)。尽管A组不具备C和D组流行株的独特差异位 点，但与C和D组同样与强毒单抗呈阴性反应。另一方面也说明:709.738和779位氨基 酸的位点差异并不影响CSFV流行株与强毒单抗的结合特性。而与强毒单抗呈阳性反应的B 组流行株具备的独特差异位点761(G)和764(L)应该是影响CSFV抗原与强毒单抗结合 的关键位点。换句话说，761(G)和764(L)具备CSFV石门强毒株的分子特征。至于是 两个位点共同变异，还是其中一个位点的变异决定了CSFV流行株与强毒单抗的结合特性， 需进一步研究。同时，761(K)位点变异并不影响毒株与强毒单抗的反应结果。 参考文献略 从繁殖障碍猪分离的猪瘟病毒Ez基因的克隆和序列分析 蒋毅立， 罗廷荣#，陆芹章 (广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005,#通讯作者) 摘 要:本研究采用RTPCR技术对来自广西不同地区的猪流产胎儿与死胎82份、新生仔猪33份和老母猪 白细胞172份进行猪疽病毒检测，结果共有9份为阳性，从阳性病料中选取6份进行猪疚病毒E2塞因的克隆、 测序，得到长度为1119核等故的目的墓因片段.应用DNAstar序列分析软件对所测定的6个毒株与已知序列 的HCLV,Shimen等毒株的相应片段进行同源性分析比较.结果显示，GXGZ02株与HCLV,Shimen株的核 普酸同源性分别为82.3%和84之/00，其余5株与HCLV,Shimen株的核普酸同源性分别为96.80/v-97.3%和 94.30/o-94.9%,推定的羲墓酸同源性分别为89.80/o-96.4%和91.2%--94.5%.6个广西毒株E2基因的所有Cys 位点都没变，可推测猪疽病毒E2蛋白在抗原结构方面保持很高的穗定性.把6个广西毒株与国内外已发表 的猪疽病毒相应序列进行比较，并建立了遗传进化树.该遗传树主要分为2大群和1个另类，除GXGZ02株 属于墓因II群外，其余5株皆属于基因I群，与HCLV.Shimen属于同一基因群. 关键词:猪疚病毒 E2基因:序列分析:同源性 猪瘟是由猪瘟病毒 (ClassicalSwineFevervirus,CSFV)引起猪的一种热性全身败血性