凋亡抑制蛋白Survivin在骨肉瘤中的表达及其与PTEN、cyclinD1蛋白表达的关系论文.docVIP

　　凋亡抑制蛋白Survivin在骨肉瘤中的表达及其与PTEN、cyclinD1蛋白表达的关系论文 【摘要】 ［目的］探讨Survivin基因的表达在骨肉瘤发生、发展中的作用及其与PTEN、cyclinD1蛋白表达的相互关系。［方法］应用免疫组化（SP）法检测40例骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤组织中Survivin、PTEN、cyclinD1蛋白的表达情况以及Survivin与PTEN、cyclinD1蛋白两者之间的相关性。［结果］Survivin在骨肉瘤中的阳性率为62.5%（25／40），明显高于对照组骨软骨瘤10.0%（2／20）的阳性率（P＜0.01）。PTEN蛋白在骨肉瘤中的阳性表达率为52.5%（21／40），而在骨软骨瘤中为95.0%（19／20），两者相比有显著差异（P＜0.01）。cyclinD1蛋白在骨肉瘤中的阳性率为80.0%（32／40），高于在骨软骨瘤中的45.0%（9／20），有统计学意义（P＜0.05）。Survivin和PTEN两者表达强度之间呈显著负相关（P＜0.01），而Survivin与cyclinD1表达呈正相关（P＜0.01）。［结论］Survivin在骨肉瘤组织中过表达与骨肉瘤的发生有关；PTEN在骨肉瘤组织中失表达，它可能下调Survivin表达.freelan osteosara and its correlation monohistochemical method（SP method）a tissues.［Result］The expression rate of Survivin a（10.0%）（P＜0.01）.The expression of PTEN a（95.0%）than that in osteosara（52.5%）（P＜0.01）.The positive expression rate of cyclinD1 a（45.0%）.There a and PTEN can doay play an promoting role and PTEN may play an protective role in the development of osteosara.Survivin amd cyclinD1 might play synergetie roles in the process of osteosara. Key munohistochemistry 骨肉瘤是最常见的骨原发性恶性肿瘤，好发于青少年，对化疗和放疗敏感性较低，预后差，易复发和转移，5年生存率低。目前，在骨肉瘤的诊断和治疗方面尚缺乏有效的指标及方法。 Survivin是近年来发现的一种细胞凋亡抑制蛋白家族成员，除具有较强的抑制细胞凋亡作用外，还有调节细胞周期和肿瘤血管保护等多种生物学特性。它选择性表达于多种常见的恶性肿瘤，而在癌旁正常组织和成人分化组织中不表达。PTEN是人类发现的第1个具有酪氨酸磷酸酶作用的抑癌基因，在调控细胞生长以及凋亡过程中也发挥着重要的作用。本文利用免疫组化技术检测Survivin、PTEN和cyclinD1蛋白在骨肉瘤中的表达，初步探讨Survivin在骨肉瘤发病机理中的作用以及其与PTEN、cyclinD1相互间的关系。 1 材料与方法 1.1 标本来源 所以病例均为收集青岛大学医学院附属医院骨科2001年1月～2005年6月手术切除标本。其中骨肉瘤标本40例，术前均未行放疗及化疗。男28例，女12例;平均年龄19.6岁（9～60岁），所有标本均经病理证实。根据Enneking外科分期，Ⅰ级8例，Ⅱ级21例，Ⅲ级11例；组织学分型中骨母细胞型16例，纤维母细胞型13例，软骨母细胞型7例，其他类型（血管扩张型、混合型）4例。每例骨肉瘤病例均经临床、影像学和病理三者结合确诊。选取同期骨软骨瘤标本20例作为对照。所有组织标本均来自本院病理科存档石蜡块，经10%甲醛固定，常规石蜡包埋，3 μm厚连续切片。 1.2 试剂与方法 采用免疫组织化学染色法（SP法）。一抗Survivin兔抗人单克隆抗体、PTEN鼠抗人单克隆抗体及cyclinD1鼠抗人单克隆抗体以及SP试剂盒均为北京中杉金桥生物技术公司产品；一抗工作浓度均为1∶50。实验步骤严格按试剂盒说明书进行。石蜡切片脱蜡至水，3%过氧化氢室温孵育10 min〔1〕，以微波枸橼酸盐进行抗原修复，正常羊血清封闭20 min，DAB显色，苏木精复染，脱水，透明封片，中性树胶封固。用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗，作为阴性对照。 1.3 结果判定标准 参照Fromoan等级相关进行统计学分析。 2 结果 2.1 Survivin、PTEN和cyclinD1