凝集反应实验-培训课件.pptVIP

HCG的结构 结构中包括α与β两个非共价键结合的亚基。α亚基与LH，FSH，及TSH的亚基相似，能与这些激素产生交叉免疫反应 而β亚基与这些激素有较大的差异，不存在于其他激素中，决定了生物活性和免疫活性的高特异性。临床上采用高效的抗HCGβ亚基 现试剂盒为HCG-β试剂 HCG检测方法 1，ELISA：酶联免疫吸附试验 2，单克隆抗体胶体金试验 3，化学发光免疫法 4，放射免疫技术 5，胶乳凝集抑制实验 6，血凝抑制试验：载体不同，吸附于RBC上 胶乳凝集抑制试验 实验原理 将含有可溶性抗原的待测标本先与已知抗体混合，充分作用后再加入抗原致敏的胶乳颗粒，因抗体已与标本中的可溶性抗原结合，胶乳颗粒不再出现可见的凝集现象。 结果判断 若试验出现明显的凝集为阴性反应，即HCG阴性； 而不出现凝集者，即为阳性反应，即HCG阳性。 临床意义： 1，诊断妊娠及宫外孕 2，滋养层细胞肿瘤的诊断与病情观察 3，先兆流产和不完全流产的诊断和监测 4，诊断异位HCG肿瘤如畸胎瘤，子宫颈癌，HCG可明显增高 思考题 试述直接凝集试验与间接凝集试验的区别？ 抗原抗体反应的类型 1．沉淀反应 √2．凝集反应 3．补体参与的反应 4. 中和反应 5. 免疫标记 凝集反应 是指颗粒性抗原(红细胞、细菌等)或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后与相应抗体（或抗原）发生特异性结合，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。 　　在免疫学技术中，凝集反应可分为直接凝集反应和间接凝集反应两大类。　 凝集反应的类型 一、直接凝集反应(direct agglutination) 是指细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集。反应中的抗原称为凝集原，参与反应的抗体称为凝集素。 将已知的可溶性抗原（或抗体）吸附或耦联到与免疫无关的载体颗粒表面,形成致敏颗粒,再与相应抗体（或抗原）作用,在适宜的电解质存在的条件下，出现肉眼所见的凝集现象，称之。 载体不同可分： 红细胞－间接血凝试验 聚苯乙烯乳胶－间接乳胶凝集试验 活性炭－间接炭凝集试验。 二、间接凝集反应 1、正向间接凝集反应 用于检测标本中的抗体 本试验简便、快速、敏感性和特异性高、成本低。 2、反向间接凝集反应 用于检测标本中的抗原 本法快速、敏感性和特异性高 + 凝集 抗原 载体颗粒 抗体 抗体致敏颗粒 A、正向：诊断试剂为已知抗原致敏的载体颗粒及相应抗体，用于检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。 3、间接凝集抑制反应 又称为胶乳凝集抑制试验 结果：免疫微球不凝集为阳性 (标本) 第一种情况： 标本中无抗原 结果：免疫微球凝集为阴性 第二种情况： 3间接凝集抑制反应 B、反向：诊断试剂为已知抗体致敏的载体颗粒及相应抗原，用于检测标本中是否存在与致敏抗体相同的抗体。 间接凝集反应的应用 　　间接凝集反应具有快速、敏感、操作简便、无需特殊的实验设备等特点，而且能用于抗原或抗体的测定，因此在临床检验中广为应用。 （一）抗原的检测 　人绒毛膜促性腺激素 　　检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的间接血凝试验。 （一）抗体的检测 　梅毒抗体 　类风湿因子　RF 一、 正向间接凝集试验 梅毒快速血浆反应素试验 Rapid Plasma Reagin （RPR） RPR试验 感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体， 感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出 梅毒的免疫性（一） 梅毒的免疫性（二） 另一种具有抗体性质的物质叫反应素（reagin），是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后5～7周产生。经正规治疗后可逐渐消失。 梅毒感染的实验室诊断 （一）非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （二）梅毒螺旋体抗原血清试验 （三） 梅毒确认试验 非梅毒螺旋体血清试验 这类试验的抗原分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液，用来检测抗心磷脂抗体。由于这些试验具有相同的标准化抗原，所以敏感性相似。可用作临床筛选，并可作半定量，用于疗效观察。 非特异性类脂抗体测定 1、性病研究实验室试验（VDRL） 2、不加热血清反应素试验（USR） 3、快速血浆反应素试验 （RPR） 4、甲苯胺红试验（TRUST） 梅毒螺旋体抗原血清试验：