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6、实验操作 1)凡是鼠疫材料及疑似材料的检验或鉴定,包括菌种开 封、细菌分离、培养或其它操作,均应在实验室生物安 全柜内进行。 2)在进行实验工作之前,工作台面先用消毒液灭菌并铺 放浸有消毒液的毛巾,随时进行工作台面的消毒。 3)进行细菌操作时,使用一次性接种环或使用接种环 电热灭菌器燃烧灭菌接种环,避免菌液或菌块飞溅。 4)稀释菌液时,将吸管插入试管或烧瓶底部,用吸球缓 慢打击菌液,避免产生气泡。 5)实验中需使用酚、氯仿等腐蚀性试剂时,应在乳胶套外 加戴一次性塑料手套。 6) 离心时,应使用双盖封闭式离心机和全封闭试管,每管 离心液总量至少低于最高容量1个刻度单位;平衡时不得有菌 液渗漏到套管中,离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。 7) 进行实验操作时,勿用手直接对接或拔开注射器和针头 ,以免划破皮肤或无意接种。 8)禁止在空气中直接排放含有菌液注射器内的气泡,以免 形成气溶胶。 9) 实验中使用的利器,应用利器盒直接收集处理。 10)接种了强毒鼠疫菌的动物必须饲养在封闭的实验动 物室内,并有明确的实验记录 11)未分离到鼠疫菌的动物尸体必须在实验室内用5%来 苏儿浸泡5昼夜,然后深坑掩埋。染疫动物尸体必须5%来 苏儿浸泡后,再高压灭菌后深埋。 12)工作完毕,检查各仪器设备是否恢复零位,做好使 用记录。 13)实验操作结束后,用消毒液消毒、清理工作台面、 地面等,并详细记录所做的工作内容。 7、出实验室及脱个人防护装备。 1)先用消毒液浸泡手套、长筒胶靴5分钟。 2)用喷雾器从上至下喷雾消毒防护服。 3)脱个人防护装备并按要求进行消毒灭菌。 4)最后使用75%酒精对手部、面部及暴露部位擦拭消毒,用3%硼酸水漱口后离开实验室。 8、关闭实验室,打开实验室紫外灯进行30分钟消毒。 (六)实验室操作防护和个人防护: 1、实验室操作防护 (1)进行实验室操作,任何时候都必须戴口罩和防护眼镜、穿着反背隔离防护服,穿防护鞋袜,不得裸露腿部和脚趾,必要时穿连体衣。 (2)在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时,应戴上合适的手套。手套用完后,先消毒再摘除,随后必须洗手。 (3)在处理完感染性实验材料和动物后,以及在离开实验室工作区域前,都必须洗手。 (4)为了防止眼睛或面部受到洒溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害,必须戴安全眼镜,必要时戴面罩(面具)或其他防护装备。 (5)严禁穿着实验室防护装备离开(如去餐厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间等),更不能把防护器材带回家。 (6)禁止在实验室的准备间和操作间里进食、饮水、吸烟、化妆、处理隐形眼镜和储存食品和饮料。 (7)在实验室内用过的防护服要消毒后再清洗,不得和日常服装放在同一柜子内。 2 个人防护除符合BSL-2的要求外,还应该符合下列条件: (1)工作人员在进入实验室时必须使用个体防护装备,包括两层防护服、两层手套、生物安全专业防护口罩(不应使用医用外科口罩等),必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。工作完毕必须脱下工作服,不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。 (2)在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水,且易于取用。实验室区域内应配备应急药品。 (3)个人防护用品的穿脱顺序 穿脱顺序应根据使用的防护服而定,一般原则是先穿后脱,后穿先脱,严格区分洁净品和污染品。 (1)穿防护用品顺序:穿内防护衣、裤-穿靴套-穿胶靴-戴帽子-戴口罩-戴手套-戴猴帽 -穿外防护衣-戴大口罩-戴手套-戴防护眼镜或面罩。 (2)脱防护用品顺序:全身喷雾消毒-消毒液泡手-摘下防护眼镜或面罩-脱外防护服-摘下大口罩-摘下猴帽- 摘外层手套- 摘帽子、口罩-脱胶靴-脱靴套- 摘内层手套-脱内防护裤、衣-使用75%酒精对手部、面部及暴露部位擦拭消毒。 (七)实验室消毒 1)鼠疫实验室日常消毒要求 1、实验室应制定日常消毒制度,定期进行消毒处理,有专人负责检查实验室日常消毒情况。 2、实验室常备75%酒精、实验室消毒槽(池)、浸泡缸、喷雾器并备有足量500-1000mg/L二氧化氯溶液或3-5%的来苏儿(或石炭酸)溶液供随时消毒使用。 3、实验室使用前后均应开启紫外线消毒装置进行空气消毒,照射时间不低于30min。 4、进行细菌学检验操作时,用1000mg/L二氧化氯溶液或3-5%的来苏儿溶液浸湿的毛巾铺工作台面,工作结束后,将毛巾和废弃物置浸泡缸消毒后高压处理。用75%酒精擦拭工作台面,用500-1000mg/L二氧化氯溶液或3-5%的来苏儿溶液擦抹地面。如发生工作面污染,培养物溅落等情况,在污
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