3.1 菊花的组织培养.pptVIP

（一）制备MS培养基 （二）外植体消毒 （三）接种 （四）培养 （五）移栽 （六）栽培 三、结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 四、课题延伸 2、培养基的使用 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （四）培养 1、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养. 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1－1.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养. 2、愈伤组织的继代培养 在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色. 3、试管苗的培养 当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养. （五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日. 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间. （六）栽培 3、移栽 珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培. 幼苗长壮后，移栽到土壤中. 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花. 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 污染途径 外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？污染物如何处理？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 思 考 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养 培养出一株完整的试管苗，必须先进行生芽培养，然后进行生根培养，如果顺序先诱导生根，就不好生芽。 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季. 课题1 菊花的组织培养 组织培养是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 1、组织培养的原理是什么？ 2、组织培养的必要条件有哪些？ 3、植物的组织培养过程怎样？ 4、影响组织培养的因素有哪些？ 本节聚焦 一、基础知识 1、植物的组织培养相关知识 （1）细胞分化 ①概念： 植物个体发育中，相同细胞的后代在 、 、 上发生稳定性差异的过程 . 细胞分化的原因： 基因的选择性表达 形态 结构 生理功能 ②特点： B.稳定性和不可逆性： C.普遍性： A.持久性： 是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度. 细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的. 生物界普遍存在，是个体发育的基础. ⑤植物组织培养的原理： 植物细胞的全能性 ④结果： 形成形态、结构、功能不同的细胞，进一步形成组织、器官等 （2）细胞的全能性 ①定义： 已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能 ②原因： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因. 细胞离体 （3）必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件 （4）相关概念: 从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官. A.外植体： 由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程 B.愈伤组织: D.脱分化： E.再分化： 细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、呈无定形状态的薄壁细胞. C.愈伤组织的特点: 离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后会通过细胞分裂形成愈伤组织 人参的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 植物组织培养的过程 离体的植物组织或细胞 愈伤组织 根和芽 完整的植物体 脱分化 再分化 2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组