用流式细胞仪进行倍性分析的方法研究.pdfVIP

维普资讯 第2l卷 第 4期 云南农业大学学报 Vo1．21 No．4 2006经 8月 JournalofYunnanAgriculturalUniversity Aug．2006 流式细胞术进行倍性分析的原理和方法 吴雅琴，常瑞丰，程和禾 (河北省农林科学院昌黎果树研究所 ，河北 昌黎O666OO) 摘要：倍性鉴定在遗传育种中具有十分重要的作用 ，倍性鉴定的方法一直是育种研究的重要内容之一。由于细 胞核 Gl期的DNA含量反应一个细胞的倍性 ，因此常常用 DNA含量来估计细胞的倍性。流式细胞术(FlowCy． tometry)是一种快速准确鉴定倍性的方法，其最突出的特点是测量快速，可在短时间内完成测定，而且操作简单。 该方法包括完整核 DNA的提取和荧光染色，然后根据它们的相对荧光强度来分析 DNA的含量。综述了流式细 胞分析法在DNA倍性分析中的应用原理和方法，并阐述了流式细胞技术的优缺点。 关键词：流式细胞术；DNA倍性 ；核DNA含量 中图分类号：Q943 文献标识码：A 文章编号：1004—390X(2006)04—0407—03 ThePrincipleandMethodofPloidyAnalysisbyFlow Cytometry WU Ya·qin，CHANG Rui·feng，CHENG He-he (ChangliInstituteofPomology，HebeiAcademyofAgriculturalandForestrySciences，ChangliO666OO，China) Abstract：Infruitbreeding，polypoidanalysishavetheveryimportantfunction．Themehtodofpoly· poidanalysisalwaysisanimportantcontentinresearchofbreeding．Becausethenuclera DNAcontent ofG1nucleusreflectstheploidyofacel1．estimationofDNA contentisfrequentlyusedforploidyde· termination．Mainadvantagesofflow cytometricassayraerapidity，precisionandconvenience，Using flow cytometryofridentificationofploidyWas ideal mehtod becauseofsimpleprepraationofsample， rapidandaccuratemeasurement．Th emethodinvolvesprepraationofaqueoussuspensionsofintactnu· cleiwhoseDNA isstainedusingaDNA fluoroehrome．Th enucleiraeclassifiedaccordingtohteirrela· tivefluorescenceintensityorDNA content．Th earticlereviewsbasicprinciplesofflow cytometrynadto describeitsusefortheploidyanalysis．Atthesametime，itelucidateadvantagesanddisadvnatagesof flow cytometry． Keywords：flow cytometry；naalysisofploidy；nuclera DNA content 倍性鉴定在植物遗传育种中具有十分重要的 是采用流式细胞仪测定法 (DNA flow cytome． 作用，倍性