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0531 超临界流体色谱法1 超临界流体色谱法（Supercritical Fluid Chromatography，SFC ）是以超临界流体作为流 动相的一种色谱方法。 某些纯物质具有三相点和临界点。在三相点时，物质的气、液、固三态处于平衡状态。 而在超临界温度下，物质的气相和液相具有相同的密度。当处于临界温度以上，则不管施加 多大压力，气体也不会液化。在临界温度和临界压力以上，物质以超临界流体状态存在；在 超临界状态下，随温度、压力的升降，流体的密度会变化。所谓超临界流体，是指既不是气 体也不是液体的一些物质，它们的物理性质介于气体和液体之间，临界温度通常高于物质的 沸点和三相点。 超临界流体具有对于分离极其有利的物理性质。它们的这些性质恰好介于气体和液体之 间。超临界流体的扩散系数和粘度接近于气相色谱，因此溶质的传质阻力小，可以获得快速 高效分离。另一方面，其密度与液相色谱类似，这样就便于在较低温度下分离和分析热不稳 定性，相对分子质量大的物质。另外，超临界流体的物理性质和化学性质，如扩散、粘度和 溶剂力等，都是密度的函数。因此，只要改变流体的密度，就可以改变流体的性质，从类似 气体到类似液体，无需通过气液平衡曲线。 超临界流体色谱兼具气相色谱和液相色谱的特点；超临界流体容易控制和调节，在进入 检测器前可以转化为气体、液体或保持其超临界流体状态。超临界流体色谱中的程序升密度 相当于气相色谱中程序升温度和液相色谱中的梯度淋洗。 1 、对仪器的一般要求 超临界流体色谱仪的很多部分类似于高效液相色谱仪，主要由三部分构成，即高压泵、 分析单元和控制系统。高压泵系统一般采用注射泵，以获得无脉冲、小流量的超临界流体的 输送。分析单元主要由进样阀、分流器、色谱柱、阻力器、检测器构成。控制系统的作用是： 控制泵区，以实现超临界流体的压力及密度线性或非线性程序变化；控制炉箱温度，以实现 程序升温或程序降温；数据处理及显示等。 (1) 色谱柱 超临界流体色谱中的色谱柱可以是填充柱也可以是毛细管柱，分别为填充 柱超临界流体色谱法（pSFC ）和毛细管超临界流体色谱法（cSFC ）。超临界流体色谱法依据 待测物性质选择不同的色谱柱。常用的液相色谱柱有硅胶柱(SIL)、氨基柱(NH2) 、氰基柱(CN) 1 新增方法。 等和各种手性色谱柱，某些应用也会使用C18 和C8 等反相色谱柱和各种毛细管色谱柱。 (2) 流动相 在超临界流体色谱中，最广泛使用的流动相是CO 流体。CO 无色、无味、 2 2 无毒、易获取并且价廉，对各类有机分子溶解性好，是一种极好的溶剂；在紫外区是透明的， 无吸收；临界温度 31℃，临界压力7.29×106Pa 。在色谱分离中，CO2 流体允许对温度、压 力有宽的选择范围。由于多数药物都有极性，有时可在流体中引入极性改性剂，最常用的改 性剂是甲醇，如加入 1%～10%甲醇，以改进分离的选择因子α值。另外，可加入微量的添 加剂，如三氟乙酸、乙酸、三乙胺和异丙醇胺待，起到改善色谱峰形的作用。除 CO2 流体 外，可作流动相的还有乙烷、戊烷、氨、氧化亚氮、二氯二氟甲烷、二乙基醚和四氢呋喃等。 通常作为超临界流体色谱流动相的一些物质，其物理性质列在表 1 中。 表 1 各种化学物质的临界压力、温度和密度 分子质量 临界温度 临界压力 临界密度 物质 克/摩尔 K MPa （标准大气压） g/cm3 二氧化碳（CO ） 44.01 304.1 7.38 (72.8) 0.469 2 水（H O ） 18.015 647.096 22.064 (217.755) 0.322 2 甲烷（CH