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生物扩大培养
* * 实验二 接种物的制备及种子扩大培养 一、实验目的: 学会制备液体种子,以及种子的扩大培养。二、实验原理: 目前工业规模的发酵罐容积已达到几十立方米或几百立方米。如按百分之十左右的种子量计算,就要投入几立方米或几十立方米的种子,所以要从保藏在试管中的微生物菌种逐级扩大为生产用种子。三、实验器材: 灭菌的250ml三角瓶液体培养基,斜面菌种,无菌水,无菌吸管,接种环,玻璃棒,摇床等 四、实验步骤: 菌种活化 斜面菌种制备 摇瓶种子制备 L1523型发酵罐中发酵 1、菌种活化: 将保存的斜面菌种接种于新鲜培养基平板,取单菌落转接斜面。 (已做) 2、斜面菌种制备: 培养基斜面(已备好) 3、摇瓶种子制备 孢子悬浮液 接种时将斜面试管中注入适量无菌水,用接种环或无菌玻棒搅动,制成孢子悬浮液。 转接 用无菌吸管吸取孢子液移接。移接也可以用倾注法,但试管口必须在火焰灼烧灭菌,冷后才能倾倒。液体培养基接种后用于摇匀。接种后均用8层纱布扎口,待培养。 28℃,200rpm振荡培养48h。
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