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502 中国医药生物技术 2016 年12 月第11 卷第6 期 Chin Med Biotechnol, December 2016, Vol. 11, No. 6 DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2016.06.004 ·论著· 人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨 细胞外基质取向支架修复山羊膝关节 全层软骨缺损的实验研究 张雨，刘舒云，郭维民，郝春香，王明杰，苑志国，黄靖香， 眭翔，张莉，卢世璧，郭全义 【摘要】 极大地影响患者的身心健康和社会功能[2-3] ，远期不 目的 探索人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基 可避免地发生骨性关节炎。组织工程理念的提出给 质取向支架构建组织工程软骨，用于修复山羊膝关节负重区 组织再生与修复带来了新的希望，并展现了巨大的 全层软骨缺损的可行性。 应用潜能。特别是软骨组织工程方面，有望成为软 方法 从人脐带中分离、扩增培养人脐带间充质干细胞，并 骨修复与再生最具有希望的策略之一。种子细胞和 进行鉴定；以猪源脱细胞软骨细胞外基质取向支架为组织工 支架材料是软骨组织工程中最为重要的部分，寻找 程软骨支架载体；在成年山羊膝关节负重区股骨髁处造全层 一种便于临床转化的优良软骨组织工程种子细胞， 软骨模型；实验分为两组，以人脐带间充质干细胞复合脱细 并复合适合种子细胞生长、分化的支架材料，用于 胞软骨细胞外基质取向支架修复组为实验组，单纯全层软骨 构建组织工程软骨更是当前软骨组织工程研究的 缺损造模作为对照组，每组 3 只山羊。术后 7 d 、14 d 分 热点之一。 别抽取关节液涂片行 HE 染色，观察炎症反应。在术后 软骨组织工程最理想的种子细胞自然是来源 3、6 个月后分别处死两组实验动物，取材进行大体形态学 于自体的软骨细胞[4] ，但是由于其来源受限且体外 观察及评分、组织学染色及评分、软骨特异性基质成分定量 扩增易发生去分化，给患者带来二次的软骨损伤等 检测。 缺点，于是寻找一种便于临床转化的优良软骨组织 结果 ①关节液涂片 HE 染色结果显示，术后两组膝关 工程种子细胞显得尤其重要。近年来，来源于围产 节炎症反应未见明显差异。②大体形态学观察及组织学染色 期组织的人脐带间充质干细胞因其具有独特的优 结果均证实，实验组修复区再生的关节软骨更加接近天然软 势而受到广泛的关注。前期的基础研究证实，人脐 骨，且与周边整合良好，获得更好的修复效果。大体形态学 带间充质干细胞不但具有和成体间充质干细胞相 及组织学评分均证实，实验组的评分均要明显高于对照组 似的多系分化潜能，还具有更好的细胞活性、增殖 （P 0.05 ）；③糖胺多糖定量检测结果显示实验组明显高于 能力和极低的免疫原性等优点[5-6] 。另外，由于其在 对照组（P 0.05 ）。 孕妇生产后视为遗弃物，所以其来源更为广泛，不 会对患者造成二次损伤，无伦理争议，更加利于临 结论 人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取 床的转化和应用。我们实验室前期制备了猪源脱细 向支架构建组织工程软骨，可用于修复山羊膝关节负重区