对照品溶液的制备.ppt

拟除虫菊酯类农药残留量测定 与DDT同属轴突毒剂，中毒症状相似。菊酯类毒理作用迅速，危害人体健康。10版收载三种。三类农药都是神经毒剂，阻断神经传导，不直接杀死神经细胞。 色谱条件与系统适用性试验??? 弹性石英毛细管柱（30m*0.32mm*0.25um)SE-54(或 DB-5），63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度270℃，检测器温度330℃。分流 比20：1；5：1（或根据仪器设置选择最佳的分流比）。程序升温。 对照品贮备液的制备?? 称取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品适量，用石油醚（60~90℃）分别制成约20~25ug/ml的溶液。 ?混合对照品储备液的制备?? 精密量取上述各对照品储备液1ml，置10ml量瓶中， 用石油醚稀释至刻度。 ?混合对照品溶液的制备?? 精密量取上述混合对照品贮备液，用石油醚稀释制成每1L分别含0ug、4ug、8ug、40ug、200ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备??? ? 取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉，取约1~2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加石油醚（60~90℃）-丙酮（ 4：1）混合溶液30ml，超声处理15分钟，滤过，药渣再重复上述操作2次后，合并滤液。滤液加入适量无水硫酸钠脱水后，于40~45℃减压浓缩至近干，用少量石油醚反复操作至丙酮除净，残渣加适量石油醚溶解，置 混合小柱［从下至上依次为无水硫酸钠2g、弗罗里硅土4g（祛除色素）、微晶纤维素1g、氧 化铝1g（除糖苷类）、无水硫酸钠2g］上，用石油醚-乙醚（4：1）混合溶液90ml洗脱，收集洗脱液，于40~45 ℃减压浓缩至近干，再用石油醚3~4ml重复 操作至乙醚除净，用石油醚溶解转移至5ml量瓶中，并定容。 1.8×1000 ×100% 测定法? 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1ul，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中3种拟除虫菊酯农药残留量。 残留溶剂测定法 药典凡例第十条：对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效去除。除正文已明确列有“残留溶剂”检查的品种必须依法进行该项检查外，其他未在“残留溶剂”项下明确列出的有机溶剂与未在正文中列有此项检查的各品种，如生产过程中引入或产品中残留有机溶剂，均应按附录“残留溶剂测定法”检查并应符合相应溶剂的限度规定。 药物中的残留溶剂指在原料药或辅料的生产中，以及制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。 2010版中国药典参考了国际协调大会（ICH）颁布的残留溶剂研究指导原则，所监测的四类有机溶剂和限量值见限度标准一览表。中国药典的限量要求与日本药典、美国药典（USP 467）欧洲药典（EP）中的规定基本相同。 仪器：GC、顶空进样装置 供试品中残留溶剂种类的确定 进甲烷气体做为色谱的死时间t0 称取丁酮，溶剂稀释作为内标溶液。 称取供试品，用内标溶液稀释成0.1-0.5g/mL的供试品溶液。 采用推荐的程序升温法，在SPB-1和HP-INNOWAX测定，时间窗为5%。 供试品溶液的制备 顶空进样：供试品常以水为溶剂，对于非水性药物，用N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜。 溶液直接进样 对照品溶液的制备 制备同上，浓度应注意： 限度检查-根据残留溶剂的限度确定对照品溶液浓度； 含量测定-根据样品中实际残留量，A对照品≤2倍供试品A色谱峰 测定法 消旋卡多曲原料药有机残留检验方法改进实验方案 公司现行方法：氯仿和二氯甲烷由于使用的检测器和色谱条件不同，分别检测，对实际操作造成麻烦。 氯仿 用HP -5毛细管色谱柱，FID检测器，进样口温度200℃，检测器温度300℃；程序升温：35℃保持8分钟，以每分钟100℃的升温速度升温至230℃，保持8分钟。　 二氯甲烷 采用固定液为二甲基聚烷氧烷的石英毛细管柱，电子捕获检测器，程序升温，在45℃保持5分钟，再以每分钟10℃的速率升至180℃，保持3分钟，检测器温度250℃，进样口温度200℃。 　 新方法的基本思路：由于FID检测器对卤素的灵敏度较差，对氯仿实际检测过程中色谱图峰型较差，常常拖尾，且二氯甲烷检测需要换条件检测，检测过程较繁琐。采用ECD检测器，有较好的灵敏度，可以保证很好的峰型，因此，基于上述缺点，本方法改进的目的是配制氯仿和二氯甲烷混合的对照品溶液和供试品溶液，放顶空瓶进样，以外标法计算。选择合适的色谱条件一次进样将氯仿和二氯甲烷分开，分离度大于1.5，节约时间，节省溶剂。 方法学验证检验项目（参考2010版药典附录194药品质量标准分析方法验证指导原则）：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范