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DNA半保留复制方式的证明20130926
* 分散复制 (Dispersive replication) 亲代DNA分子在复制过程中分散到子代的DNA分子中 全保留复制 (Conservative replication) 亲代DNA分子在复制过程结束后不分开,复制出全新的子代DNA分子 半保留复制 (Semiconservative replication) 每个子代DNA分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的 半保留复制的 与 James Watson(1928- ) Francis Crick(1916-2004) 1957年,Watson和Crick在发表文章提出DNA的双螺旋结构后不久,就根据DNA分子的结构提出了DNA分子的半保留复制假说。 Matthew Meselson (1930- ) Franklin Stahl(1929- ) 实验过程 1958年,Meselson和Stahl在加州工学院工作期间,利用大肠杆菌研究遗传物质DNA。 用15NH4Cl作氮源的培养基N 培养数代 使碱基中的14N全被置换为15N 用14NH4Cl作氮源的培养基 培养,每隔一定时间取样,分离其DNA并进行密度梯度离心 E.coli Meselson和Stahl的实验 density gradient centrifugation Cs+离子在水中会下沉,同时也会扩散。 a、 如果扩散速度接近或大于下沉速度,就等于没有下沉现象。 b、 如果施以高速离心,加速Cs+下沉速度,使其超过扩散速度,Cs+会部分下沉形成一个浓度的梯度(gradient),也就是密度的梯度。 c、 将DNA溶解于适当浓度的CsCl水溶液中,并以140,000g高速离心,DNA就会跑到离心管中某一相相当它密度的位置,形成一个带状。在这一位置中,CsCl溶液的密度等于DNA的密度。 d、 原本在有15NH4Cl中培养的细菌DNA最重(15N /15N) 在14NH4Cl中培养过一代后,得到的DNA密度居中(14N /15N),此时原来的(15N/15N)不见了 再过一代之后,又出现两种密度, 除了一个居中(14N/15N),又有一种更轻的(14N /14N) 原本在有15NH4Cl中培养的细菌DNA最重(15N /15N) 在14NH4Cl中培养过一代后,得到的DNA密度居中(14N /15N),此时原来的(15N/15N)不见了 再过一代之后,又出现两种密度, 除了一个居中(14N/15N),又有一种更轻的(14N /14N) *
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