F细胞株的建立.PDFVIP

第二军医大学学报 年 月第 卷第 期 ：／／ ２００８ ９ ２９ ９ ｈｔｔ ｗｗｗ．ａｓｍｍｕ．ｃｎ 　 　 ｐ ｊ · · １０２９ 　 ， ， ， ＡｃａｄｅｍｉｃＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｅｃｏｎｄ Ｍｉｌｉｔａｒ ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔ Ｓｅ ．２００８ Ｖｏｌ．２９ Ｎｏ．９ ｙ ｙ ｐ ： ／ ·论 著· ＤＯＩ １０．３７２４ＳＰ．Ｊ．１００８．２００８．０１０２９ 　 膜联蛋白 表达稳定下调的小鼠肝癌 细胞株的建立 Ａ７ ＨｃａＦ １ ２ ２ ３ ２  王志强 ，唐建武 ，王绍青 ，孙成荣 ，王 波 　 大连医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科，大连 １． １１６０１１ 大连医科大学病理学教研 ，大连 ２． １１６０４４ 大连市第五人民医院肿瘤科，大连 ３． １１６０２１ ［摘要］ 建立针对膜联蛋白 （ ）的 （ ）稳定转染的小鼠肝癌细胞株 ，为后续 目的： Ａ７ ａｎｎｅｘｉｎＡ７ ｓｈＲＮＡ ｓｍａｌｌｈａｉｒｉｎＲＮＡ ＨｃａＦ 　 ｐ 研究奠定基础。 构建 条针对 的 （ 、 、），分别与 连接，构建表达载体并分别转染 方法： ３ ａｎｎｅｘｉｎＡ７ ｓｈＲＮＡ ｓｈＲＮＡ１２ ３ Ｓｉｌｅｎｃｅｒ ｐ ＨｃａＦ细胞，在 ｍＲＮＡ 和蛋白质水平比较 ３ ｓｈＲＮＡ对 ａｎｎｅｘｉｎ Ａ７表达的抑制作用，筛选抑制效果最好的 ｓｈＲＮＡ转染 。稳转后用含 ／ 的完全培养基筛选，获得 表达稳定下调的 细胞株后传代扩增，应用 ＨｃａＦ ４００ ｇ ｍｌＧ４１８ ａｎｎｅｘｉｎＡ７ ＨｃａＦ μ 印迹法检测 细胞 蛋白的表达，并与空载体转染组及正常对照组进行比较。 经 测序鉴 Ｗｅｓｔｅｒｎ ＨｃａＦ ａｎｎｅｘｉｎＡ７