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唾液淀粉酶最适pH值的测定实验(设计性实验)
唾液淀粉酶最适pH值目的。实验原理：仪器材料和试剂药品： 仪器材料：37 C恒温水浴箱，分光光度计，电磁炉。 试剂药品： 0.02％淀粉溶液. 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶液 碘液 实验 1、 缓冲液的配置：根据下表[5]，配置各个pH值的缓冲溶液各10ml pH 值 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 磷酸氢二钠 12.3 18.5 26.5 37.5 49.0 61.0 72.0 81.0 87.0 91.5 94.7 磷酸二氢钠 87.7 81.5 73.5 62.5 51.0 39.0 28.0 19.0 13.0 8.5 5.3 2唾液的获取：[6] 蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头.轻启双唇，将下嘴唇搁在烧杯边缘，让唾液自然流入试管中.蒸馏水漱口蒸馏水唾液的稀释：取10支试管，分别编上号00～09 管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 唾液(ml)0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 蒸馏水(ml) 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0 16.0 18.0 20.0 4、唾液稀释倍数的选取 另取10支试管，分别编上0～9号，各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入1ml的0.02％的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒温5分钟后取出，滴加2～3碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一支，记录稀释倍数。 5)测量pH： 取12支试管，分别标上号1～12，按下表操作 管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.02％淀粉溶液(ml) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2ml缓冲溶液pH 6.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 (保温10min) C 37 摄氏度 稀释唾液(ml) 1 1 1 1 1
以蒸馏水调零，用分光光度计测出各试管中溶液的吸光度A值，做好记录。以pH值为横坐标，吸光度A为纵坐标，在坐标纸上作出平滑曲线，取曲线最低点对应的pH值，即为唾液淀粉酶的最适pH值。
参考文献：唾液的提取方法ab,选自临床口腔杂志，2008年3月第224期
齐齐哈尔医学院生化实验
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