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电喷雾傅立叶变换离子回旋共振高分辨质谱实验 一、电喷雾-傅立叶变换离子回旋共振高分辨质谱 近年来随着质谱技术的不断进步，质谱分辨率越来越高，傅立叶变换离子回 旋共振质谱(FT-ICR MS) 是一种具有超高质量分辨能力的新型质谱仪，在石油 组分相对分子质量范围(200 - 1000 Da) 内分辨率高达几十万甚至上百万，可精确 地确定由 C、H、S、N、O 及其主要同位素所组成的各种元素组合，使得从石 油酸的分子元素组成层次上研究石油组成成为可能，即石油组学(Petroleomics)。 电喷雾(ESI)结合傅立叶变换离子回旋共振质谱可直接进样分析原油样品，不需 做任何前处理，是从分子水平表征原油的一种强大手段。下面将主要介绍电喷雾 (ESI)与傅立叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR MS)的基本原理 1) 电喷雾(ESI)原理 电喷雾(ESI)是由Fenn 发明的一种软电离技术，通常没有碎片离子峰，只有 整体分子的峰，能够从高浓度复杂烃类基质中选择性地电离微量的杂原子极性化 合物，广泛用作多种质谱仪的电离源。 图1 电喷雾电离源(ESI)示意图 ESI 的工作原理是：样品溶液从具有雾化气套管的毛细管流出时，在电场和 雾化气（通常是氮气）的作用下喷成雾状的带电微液滴；在热气体作用下，液滴 中溶剂被快速蒸发，液滴直径不断变小，表面电荷密度不断增大。当达到瑞利限 度时，即表面电荷产生的库仑斥力与液滴表面张力大致相等，则会发生“库仑爆 炸”，产生带电的更小微滴，最终把样品离子从液滴中排挤出来，形成的样品离 子通过锥孔、聚焦透镜进入分析器后被检测。产生的样品离子可能带单电荷或多 1 电荷，这和样品分子中的酸性和碱性基团数量有关。通常小分子样品得到带单电 荷的准分子离子；大分子样品则得到多种多电荷离子。 通常认为电喷雾可以用两种机制来解释： （1 ）小分子离子蒸发机制：在喷针针头与施加电压的电极之间形成强电场, 该电场使液体电,带电的溶液在电场的作用下向带相反电荷的电极运动,并形成带 电的液滴, 由于小雾滴的分散，比表面增大，在电场中迅速蒸发,结果使带电雾滴 表面单位面积的场强极高，从而产生液滴的“爆裂”。重复此过程，最终产生分 子离子。 (2)大分子带电残基机制：首先也是电场使溶液带电，结果形成带电雾滴， 带电的雾滴在电场作用下运动并迅速去溶，溶液中分子所带电荷在去溶时被保留 在分子上，结果形成离子化的分子。 一般来讲,电喷雾方法适合使溶液中的分子带电而离子化。离子蒸发机制是 主要的电喷雾过程,但对质量大的分子化合物,带电残基的机制也会起相当重要的 作用。电喷雾也可测定中性分子,它是利用溶液中带电的阳离子或阴离子吸附在 中性分子的极性基团上而产生分子离子。 ESI 对石油中占绝大多数的烃类化合物没有电离作用，而在正离子和负离子 模式下选择性地电离石油中微量的碱性（主要是碱性氮化物）和酸性（主要是环 烷酸）化合物，中性氮化物一般会出现在负离子谱图中，但电离选择性较差。 2) 傅立叶变换离子回旋共振质谱仪简介 FT-ICR MS 的核心是分析池，在垂直磁场方向上设置互相垂直的两组电极， 一组电极激发电子使其以较大半径产生回旋运动，另一组则接收由周期性运动于 两极之间带电离子产生的感应电流，检测极接收的高频电流周期与离子的回旋运 动周期相同，根据不同质荷比离子的回旋周期不同的原理，就可通过检测电流信 号的频率来计算离子的质荷比，而且信号的强度反映离子的丰度。 实际检测时多种质荷比离子同时进入检测池，FT-ICR MS 用特定波形的高频 电场，把某一质量范围内的离子同时激发到半径较大的回旋轨道上，各离子以各 自的回旋频率运动，在检测极上就感应出叠加的多种频率电流信号，通过傅立叶 变换可快速把时域谱变换成频域谱，再从频率换算成质荷比，最终获得各离子的 质荷比及丰度。 FT-ICR MS 无需将离子分离，同时检测不同离子的质荷比及丰度，具有较 扫描型质谱(磁质谱、四极杆等)高得多的灵敏度；用感应电流检测离子的方式是 非破坏性的，离子可继续被储存、分析，从而实现多级质谱分析。它还具有两个 重要的特点：超高分辨能力和质量精确度，很容易实现几十甚至上百万的分辨率， 2 新型仪器无需