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第八章 动物实验基本技术和方法 一、 实验前准备 理论准备：了解动物实验基础知识 制定研究计划和方案 查阅关于实验方法的参考文献 条件准备：仪器、器械、药品 运输 实验和饲养场所 二、抓取和固定 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 犬 猴 三、性别、发情、配种与怀孕鉴定 四、编号和标记 1、染色法：浅色动物 3.5-5％苦味酸溶液（黄色） 0.5%中性红或碱性品红溶液（红色） 2％硝酸银溶液（咖啡色，涂后光照10分钟） 煤焦油酒精溶液（黑色） 龙胆紫溶液（紫色） 2、打耳孔法：小型动物 3、剪趾法：小型动物 4、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分 5、烙印法：刺号钳，中、大型动物 6、针刺法：中、大型动物 7、号牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物 8、剪毛法：大动物 9、笼子标号 五、分组 随机化分组：避免人为影响 例：将14只小鼠随机分成两组。 ①先将小鼠编为I～14号， ②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄12个随机数字。 编排如下； 动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 随机数日 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23 归 组 B B A B A A B A B B A A A A ③奇数代表A织，偶数代表B组 ④A组： 3 5 6 8 11 12 13 14 B组： 1 2 4 7 9 10 ⑤调整分组：接刚才随机数字23继续抄表得随机数字78，用78除以8（因为需要把C组的8个数字调整掉一个），得余数6，所以把A组的第6个动物，即12号动物调整到B组 ⑥ 最终分组 A组： 3 5 6 8 11 13 14 B组： 1 2 4 7 9 10 12 例：12只大鼠随机分为3组 ①大鼠编号1~12 ②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄12个随机数字。 ③每个数分别用3除，记录余数， ④ 根据余数分组 大鼠编号：1， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8， 9， 10， 11， 12 随机数字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79， 69，10 余数： 2， 0， 1， 2， 0， 2， 0， 0， 1， 1， 0， 1 组别： B， C， A， B， C， B， C， C， A， A，C， A ⑤ A：3，9，10，12 B；1，4，6 C：2，5，7，8，11 ⑥调整分组：接刚才随机数字10继续抄表得随机数字61，用61除以5（因为需要把C组的5个数字调整掉一个），得余数1，所以把C组的第1个动物，即2号动物调整到B组。 ⑦最终分组 A：3，9，10，12 B；1， 2 ，4，6 C：5，7，8，11 六、去毛 1、剪毛：弯头剪毛剪 2、拔毛：大小鼠尾静脉、家兔耳缘静脉注射 3、剃毛：将剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸温肥皂水润湿，用剃刀顺着被毛方向剃毛，用电动剃毛推剪，则逆被毛向剃毛。 4、化学脱毛： 常用脱毛剂 ①8%硫化钠水溶液 ②硫化钠3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水调成糊状 ③硫化钡50克，氧化锌25克，淀粉25克，加水100毫升调成糊状 ④硫化钠10克，生石灰15克，加水到100毫升，适合犬和其他大动物。 七、给药 1、自动口服：加入饲料或饮水 2、投喂药片：掰开口，放到舌根部 3、灌胃（i.g)： 4、直肠给药 5、呼吸道给药 6、滴鼻 7、点眼 8、经皮肤给药：常用于检测药物、毒物、化妆品等的透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠选择脊柱两侧皮肤，大小鼠常采取浸尾方式。 9、皮内注射(i.d)：一般用于接种或过敏实验。将药液注射在真皮和表皮之间。 10、皮下注射(s.c)：颈背部、腋下、腿、侧腹 11、肌肉注射(i.m)：股部肌肉 12、腹腔注射(i.p)：下腹部腹中线两侧 13、静脉注射(i.v)： 小鼠：尾