大孔吸附树脂比色法测定维药香青兰中总三萜酸成分论文.docVIP

　　大孔吸附树脂比色法测定维药香青兰中总三萜酸成分论文 田树革，王良玉，刘宏炳，燕雪花 【摘要】 目的测定香青兰全草中总三萜酸成分含量。方法以齐墩果酸为指标，采用香草醛-冰醋酸 及高氯酸显色后用分光光度法测其含量。结果齐墩果酸的线性范围是8.48～42.4 μg·ml-1，测得香青兰中总三萜酸含量约为14.9 mg/g，RSD为1.23%。结论 用大孔吸附树脂对香青兰除杂后富集利用显色法测定总三萜酸是可行的，该方法具有简便、快速、准确、重复性好等优点。 【关键词】 香青兰； 三萜酸； 大孔吸附树脂； 比色法； 齐墩果酸 Abstract：ObjectiveTo determine the content of the Tritepenoidic Acid in Dracocephalum moldavica L .Methodsacroreticular resin-Colorimetric method is suitable for the determination of tota1 tritepenoidic acid from Dracocephalum moldavica L．This method is simple.freel moldavica L； Tritepenoidic Acid； Macroreticular resin； Colorimetric method ； Oleanolic acid 香青兰Dracocephalum moldavica L.为唇形科青兰属植物，分布于华北、东北、西北等省区，新疆以南疆和东疆栽培较多。其药用全草为干燥地上部分，有泻火、清热、止痛、止血等功效。在维吾尔医和民间常用于治疗冠心病及高血压病、寒性神经性头痛、寒性感冒、气管炎等疾病［1，2］。近年来经药物成分分析，香青兰主要含有挥发油［3］、氨基酸［4］、微量元素［5］、萜类、黄酮类、多糖等［6］，其中含有三萜类化合物齐墩果酸［7］、熊果酸等［8］。A. Kakasy等［9］利用HPLC与GC-MS分析了香青兰中非挥发性成分，V.Povilaitytoee等［10］研究了香青兰的抗氧化活性，洪秀芳等［11］做了香青兰治疗冠心病、心绞痛的疗效分析研究，鉴于香青兰临床疗效显著，有进一步研究的价值，对其总三萜酸成分进行了含量测定研究。现报道如下。 1 材料 1.1 仪器S54 UV－Vis Spectraphotometer 54 ,S54PC紫外可见分光光度计数据处理软件包（上海棱光技术有限公司），RE－52旋转式蒸发器（上海安亭电子仪器厂），YOKO－SY紫外线分析摄影仪（武汉药科新技术开发公司），BS110S电子天平（sartorius德国产），KQ－400DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），YOKO－BD薄层电动点样仪（武汉药科新技术开发公司），大孔吸附树脂（HPD－100型沧州宝恩化工有限公司）。 1.2 药材香青兰（购于新疆乌鲁木齐，自治区维吾尔医院）药材经新疆医科大学中医学院主任药师李永和鉴定。 1.3 试剂齐墩果酸标准品(中国药品生物制品检定所0709-9803)，所用其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 标准品溶液的制备 精密称取齐墩果酸标准品10.6 mg，用无水乙醇定容于25 ml容量瓶中，即得0.424 mg/ml的齐墩果酸标准品溶液。 2.2 供试品溶液的制备 2.2.1 回流提取 称取香青兰全草5.0 g，用甲醇回流提取6 h 至无色，蒸干后再用甲醇溶解并定容于50 ml容量瓶中。 2.2.2 富集总三萜酸 取3 ml定容后的甲醇溶液至大孔吸附树脂上，分别用40 ml的水，30%乙醇，50%乙醇，75%乙醇、无水乙醇重复洗脱两次，定量收集，每份40 ml，按齐墩果酸的硅胶薄层层析鉴别方法进行定性检查，待无水乙醇收集液呈阴性后，方终止收集，共有8份。 2.3 显色反应分别取4 ml 75%，无水乙醇收集液在水浴中蒸干，加入0.5 ml 5%香草醛冰醋酸和0.8 ml高氯酸，在60℃的水浴中加热10 min，取出置冰水中冷却2～3 min，加冰醋酸定容至10 ml，摇匀后在560 nm处测定吸收值。 2.4 波长的选择齐墩果酸与香草醛-冰醋酸及高氯酸显色后，可在560 nm处有最大吸收且空白对照无干扰。 2.5 标准曲线的绘制精密吸取齐墩果酸对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml 按显色反应的步骤在560 nm处测定吸收值，以吸收度为横坐标，齐墩果酸为纵坐标作标准曲线，回归方程为：Y=68.236X+3.761，r=0.996 8。 2.6 样品含量测定从定容后的50 ml香青兰甲醇溶液中吸取3 ml的甲醇液上样于