大孔吸附树脂纯化贯叶连翘总黄酮工艺研究论文.docVIP

　　大孔吸附树脂纯化贯叶连翘总黄酮工艺研究论文 【摘要】 目的 研究大孔吸附树脂分离和纯化贯叶连翘总黄酮的工艺条件。方法 以总黄酮的吸附量和解吸率为考察指标，对4种不同类型的树脂进行评价。结果 AB8型大孔吸附树脂对贯叶连翘中总黄酮具有较好的分离能力。结论 采用本法分离纯化贯叶连翘总黄酮简单可行。 【关键词】 贯叶连翘； 总黄酮； 大孔吸附树脂； 纯化 【Abstract】 Objective To obtain the optimal conditions for separating the flavonoids from the extract of Hypericum perforactum L. by selecting appropriate macroporous absorption resins..Methods Separating efficiency of four types of macroporous absorption easuring the absorption ratio and eluting ratio of flavonoids. Results The AB8 macroporous absorption resin had better separating efficiency. Conclusion This method is simple,feasible and suitable for industry production. 【Key perforactum L.；flavonoids；macroporous absorption resin; purification 贯叶连翘（Hypericum perforatum）属金丝桃属藤黄科多年生草本植物，全草可入药。这种野生植物的全草或带根全草有药用价值。贯叶连翘具有清热解毒、收敛止血、利湿等功效，主要用于止血、抗炎、治疗妇科病等。目前，用贯叶连翘提取物制成的制剂已在欧美大量上市，用于治疗抑郁症、甲型和乙型肝炎及艾滋病等。此外，还有文献报道其有抗肿瘤活性。贯叶连翘含有多种具有生物活性的化学成分，不同成分具有不同的药用价值.freell分别置25 ml容量瓶中,其余操作均同标准曲线制备，在紫外可见光分光光度计下400～700 nm 处扫描，标准品最大吸收波长511.3 nm，样品液最大吸收波长为510.5 nm，综合上述实验拟定510 nm为检测波长。 2.1.2 标准曲线的绘制 精密量取在120℃干燥至恒重的芦丁标准品12.5 mg置25 ml量瓶中，加一定浓度的甲醇适量，超声30 min使溶解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，准确吸取20 ml置于25 ml容量瓶中，加水至刻度，即得0.4 mg/ml 的标准品溶液。精密量取上述芦丁标准品溶液0 ml、 1 ml、 2 ml、 3 ml、 4 ml、 5 ml、 6 ml分别于7支50 ml容量瓶中，编号，各加水至6 ml，加入1ml 5% 亚硝酸钠溶液，摇匀，静置6 min，加入1 ml 10% Al(NO3)3 溶液，摇匀，放置6 min，后加入4.3%的NaOH溶液10 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，以0号容量瓶为空白试剂，照紫外可见分光光度法（《中国药典》2005年版一部附录VA），在波长510nm处测定吸光度（结果见表1）。表1 各样品液吸光度表以吸光度A和浓度C进行回归，得线性回归方程为：C= 0.093 0A+0.000 2，r=0.999 83，线性范围0.008 mg/ml～0.048 mg/ml. 2.2 样品溶液的制备 药材的取样：因为贯叶连翘是全草入药，且在各个部位的总黄酮的含量不一致，为使取样均一性且保证其全草入药，故将其分为枝和叶两部分分别粉碎干燥，混匀后称取，以消除取样带来的误差。 贯叶连翘中黄酮的提取：选用4种方法提取贯叶连翘中的黄酮，分别是：乙醇回流提取法、碱液提取法、超声提取法、渗漉法。由实验结果得碱提效果最佳，后进行碱提提取条件的考察，包括碱水量、提取次数、碱水浓度、提取时间，从而确定最佳提取工艺，得到黄酮的提取液。 2.3 静态吸附实验 2.3.1 树脂预处理 树脂先用乙醇充分溶胀，然后用乙醇洗至流出液加适量水无白色浑浊现象，再用去离子水洗尽乙醇至无味即可。 2.3.2 树脂的筛选 吸附率的测定：精密称取处理好的树脂2 g，分别置120 ml磨口三角瓶中，将样品液（样品原液浓度0.076 46 mg/ml，吸光度0.820）过滤，分别精密加样品液50ml，静置24 h，充分吸附后，取上层液，过滤，先吸取滤液0.1ml，测得吸光度为0.013，因吸光度在0.3～0.7之间稳定性较好