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福寿螺在甲氨基阿维菌素影响下的酶活性研究.pdf

26 2016, Vol.36, No.24 农业与技术 ※农业科学 福寿螺在甲氨基阿维菌素影响下的酶活性研究 陈 琳 (赣南师范大学生命与环境学院( 脐橙学院) ,江西赣州 341000 ) 摘 要:本文主要研究甲氨基阿维菌素对福寿螺酶活性影响,以几组对照试验分析甲氨基阿维菌素对福寿螺的作用机理及 影响,旨在为研究福寿螺的防控措施及高效安全的杀螺剂提供依据及帮助。 关键词:福寿螺;甲氨基阿维菌素;影响;酶活性 中图分类号:S482.3 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20161233025 近几十年来,福寿螺在我国多个省份迅速蔓延,严 mmol/L0.3mLHcl ,样品管加入2.5mmol/L0.3mL 邻苯三 重的影响农产品的质量与产量,并且由于福寿螺是广州 酚,总体积为 9mL。置于倾入光径lcm 比色杯中并计时, 管圆线虫的寄宿主之一,一旦人类感染常会引起急性头 于 325nm 波长下测定吸光度值 A0 ,30s 读数 1 次,共记 痛、发热、四肢无力、皮肤过敏等症状,严重者可致痴 录 5min 内的吸光度值,并以时间、吸光度值作坐标图, 呆或者死亡。 邻苯三酚的自氧化速率 AA0 是用该线性方程的直线斜率 表示。每次测定重复 4 次,确保实验结果的准确性。 1 实验准备 此操作方法同上,但在加入邻苯三酚之前,一定先 加入 300µL 的酶源上清液。并减少加入二次蒸馏水确保 按标准参照傅先元的分级标准,选取成螺个体重量 蒸馏水一样。迅速倒入 1cm 比色皿中,以 0.01mol/L HCl 为 15 ± 1.5g,在相同条件下进行试验预处理,之后再分 缓冲液为参比,于 325nnl 波长下测定吸光度,每隔 0.5min 别进行对照实验。 计数,连续测定 5 min。邻苯三酚自氧化速率测定用蒸馏 浸螺法进行毒力测定:称取一定量的 90.2%甲氨基阿 水代替酶源上清液。每次实验重复 4 次,记录该曲线的 维菌素原药,用丙酮溶解后配置成母液,加水稀释,成螺的 斜率即为△ASOD.SOD 酶活力单位定义为在25 ℃、pH 8.2 处理浓度为 0.8、0.4、0.2、0.1、0.05mg/L ,均设清水为对照 时每 1 min 抑制邻苯三酚自氧化速率达 50%的酶量。 处理,每个浓度重复3 次。用小桶 (8.75cm ×8.75cm ×16.5cm) 邻苯三酚自氧化的抑制率定义为: 盛 500mL 药液和清水,每桶投螺 15 只。在 25 ±1℃的恒温 抑制率 (E)=( △ A0-- △ ASOD) /△A0 ×100%; 室浸泡福寿螺,隔 6h 观察福寿螺的行为,分别于 24h、48h 单位酶活力(U/mL )=(E ×V N)/(50% ×V ) ; 1 × 2 统计死亡情况,计算死亡率和校正死亡率。 SOD 活力(U/mg )= 单位活力 / 测定样品浓度; 酶液提取:采用浸螺方法对成螺进行毒力测定, (E:邻苯三酚自氧化的抑制率;V1:反应液总体积; 用 DPS 6.55 软件建立毒力回归方程,并设置 LC25 、

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