心叶烟NPR1基因全长cDNA序列的克隆及表达分析（英文）.pdfVIP

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2017-06-16 发布于山东
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心叶烟NPR1基因全长cDNA序列的克隆及表达分析（英文）.pdf

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植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA 39(5)：482-490(2009) MolecularCloningandCharacterizationofaNovel NPR1Gene rOm Nicotianaglutinosa ZHANG Liang，ZHANG Ying，SHIJing，ZHANG Lu，GUO Xing—qi (CollegeofLifeSciences，ShandongAgriculturalUniversity，StateKeyLaboratoryofCropBiology，Taian271018，China) Abstract： (non—expressorofpathogenesis—relatedgene1)geneisakeyregulatorofsystemicacquired resistance．whichconfersbroad—spectrum resistanceinArabidopsis．ThisstudyreportstheisolationofaNPRl ortholog gene designated asNgNPRl from Nicotiana glutinosa．The full—lenght cDNA ofNgNPR1was 2253bpencoding588aminoacids．Analysisofexort／intronstructureoftheNgNPR1geneshowedhtatNgU- pRlconsistedoffourexonsandthreeintrons．Southern blotanalysisrevealedhtatNgNPR1wasasingle—copy geneinN．glutinosa．TransientexpressionanalysisusingNgNPR1一GFP greenfluorescentprotein、fusion geneinonionepidermalcellsrevealedhtattheNgNPR1proteinwaslocalizedinhtecytoplasm andmovedinto thenucleusaftersalicylicacid(SA)treatment．NorthernblotanalysisindicatedhtatNgNPR1wasinducedby signalmoleculesforplantdefenseresponses，suchasSA，mehtyljasmonate(MeJA)，H2O2andethylene (ET)．TranscriptionlevelofNgNPR1wasalsoup-regulatedafterinoculationswithAlternariaaltemata， Pseudomonassyringaepv．mbaci，nadTobaccomosaicvirus(TMV)respectively．Theseresultssuggesthtat theNgNPR1mayplayan importantrole inresponsetopathogen infection inN．glutinosaplant． Keywords：Nicotianaglutinosa；NgNPR1；cDNA cloning；RACE；expressionanalysis 心叶烟 NPR1基因全长 cDNA序列的克隆及表达分析张良，张颖，石静，张露，郭兴启 (山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室，泰安271018) 摘要：NPR1(non—expressorofpathogenesis—relatedgene1)基因在拟南芥系统获得抗性中起着关键作用，可调控拟南芥植株广谱抗性的发生。本文报道了从一C,nt炯中克隆NPR1同源基因(NgNPR1)及其表达特性的研究结果。NgNPR1cDNA全长 2253bp，编码588个氨基酸。将NgNPR1基因组全长与cDNA序列进行比对发现，NgNPR1基因组DNA含有4个外显子和3个内含子。Southern杂交分析表明，在心叶烟基因组中NgNPR1为单拷贝基因。采用绿色荧光蛋白在洋葱表皮瞬时表达的试验，证明了NgNPR1蛋白在水杨酸诱导时会从细胞质转运到细胞核中。Northem杂交分析发现，NgNPR1基因可以被与植物抗病相关的信号分子如水杨酸、茉莉酸甲酯、过氧化氢和乙烯所诱导。进一步研究发现，植物病原物如赤星病菌、青枯病菌和烟草花叶病毒对心叶烟植株