柚苦味形成相关基因CmLGT的克隆与分析.pdfVIP

维普资讯 果 树 学 报 2008，25(4)：607~610 JournalofFruitSeienee 柚苦味形成相关基因CmLGT的克隆与分析 眭顺照 12，张 倩 ，罗江会 1,27曾顺德 ，张 超 ，吴纯清 (重庆市农业科学院果树研究所 ，重庆 402260；。西南大学园艺园林学院，重庆 400715) 摘 要 ：为研究柚苦味形成 的分子机理，以梁平柚为材料 ，采用 PCR和 RT—PCR技术扩增获得 了柠檬苦素类化合物 葡萄糖转移酶(LGT)基 因C G 的DNA序列和 cDNA序列 。cDNA长 1536bp，推测的编码蛋 白CmLGT包含 51．1 个氨基酸 ，理论分子量为 57．5ku，具有 1个含有 44个氨基酸残基 的UDP一葡萄糖结合域 (UDP—glucoseBindingDo— main)2个含有 4个氨基酸残基的保守糖基化位点。扩增得到的CmLGT基 因DNA和cDNA存在 26个碱基的差异， 可能是 DNA和 cDNA分别进行扩增时，其模板为 同一位点上的等位基 因造成 的。 关键词 ：柚 ；柠檬苦素类化合物葡萄糖转移酶 ；CmLGT基 因；苦味 中图分类号：$666．3 文献标识码：A 文章编号：1009—9980(2008)04—607—04 M olecularcloningandanalysisofanovelgeneencodinglimonoidgluco— syltransferase(LGT)inCitrusmaxima SUIShun—zhao1,2,ZHANGQian,LUOJiang-hui1,27ZENGShun-de．ZHANGChao．WUChun—qing (FruitResearchInstitute，ChongqingAgriculturalAcademy，Chongqing402260China；。CollegeofHorticultureandLnadscape，Southwest University，Chongqing400715China) Abstract：Limonoidglue0syltransferaseisakeyenzymeinrelationtotheaccumulationofnon—bitterlimonoidglucosidesin citrus．Inourwork，limonoidglucosyltransferase(LGT)geneCmLGTwasisolatedandcharacterizedfroinCitrusmoogimacv． LiangpingYou．BothDNAandeDNArfagmentsofthegenewereisolatedbyPCRandRT-PCR．TheaccessedcDNAwas 1536bpinlengthencoding511deducedaminoacidswithapredictedmolecularmassof57．5ku，whichincludedtheregion fortheUDP—glucosebindingdomainwith44aminoacidresidues．Therewere26differentbasesbetweenDNA andeDNAof amplifiedCmLGT．Thereasonmaybethattemplatewasthealleleonthesingleloci，whiletheDNAandcDNA hadbeenam— plifiedrespectively． Keywords：Citrusmaxima；Limonoidglucosyltransferase；CmLGT；Bitterness 柑橘的苦味严重影响着柑橘鲜食以及加工产品 并且在酸性条件和果实受到生理损伤时，水解酶的 的品质 ，柑橘苦味形成方面的研究始于 20世纪 30 作用得到加强3[_51。随着果实的成熟，柠檬苦素类化合 年代。已证实柑橘苦味来 自2方面的作用 ．黄酮类化