侵染节瓜的3种病毒多重PCR检测体系的建立.pdfVIP

园 艺 学 报 2011 ，38 （11）：2215 –2222 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 侵染节瓜的 3 种病毒多重 PCR 检测体系的建立 1,* 2 1 1 1 赵 芹 ，李华平 ，谢大森 ，罗少波 ，彭庆务 1 2 （广东省农业科学院蔬菜研究所,广州 510640 ； 华南农业大学植物病毒研究室,广州 510642 ） 摘 要：根据侵染节瓜 3 种病毒——小西葫芦黄花叶病毒（ZYMV ）、番木瓜环斑病毒（PRSV ）和黄 瓜花叶病毒（CMV ）的外壳蛋白基因保守区序列设计特异引物，在建立各种病毒单项PCR 技术的基础上， 通过优化多重 PCR 反应条件，初步建立了能同步、快速、灵敏地检测这 3 种病毒的多重 PCR 检测体系， 为节瓜病毒病原的检测提供了理论与技术支持。 关键词：节瓜；小西葫芦黄花叶病毒；番木瓜环斑病毒；黄瓜花叶病毒；多重 PCR 中图分类号：S 642.9 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2011 ）11-2215-08 Development of a Multiplex RT-PCR Protocol for the Detection of Three Viruses on Benincasa hispida. var. chieh-qua 1,* 2 1 1 1 ZHAO Qin ，LI Hua-ping ，XIE Da-sen ，LUO Shao-bo ，and PENG Qing-wu 1 2 （Vegetable Research Institute，Guangdong Academy of Agricultural Sciences，Guangzhou 510640 ，China；Laboratory of Plant Virology，South China Agricultural University，Guangzhou 510642，China ） Abstract ：According to the conserved nucleotide sequences of coat protein genes of Zucchini yellow mosaic virus （ZYMV ），Papaya ring spot virus （PRSV ）and Cucumber mosaic virus （CMV ）infected chieh-qua specific primers were designed. Based on the establishment of the optimal RT-PCR for the single detection of ZYMV，PRSV and CMV ，a multiplex RT-PCR protocol for the detection of three viruses on chieh-qua was developed，which provided a simple ，rapid and economic method for simultaneous detection of three chieh-qua viruses to supp