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园 艺 学 报 2011 ，38 （9 ）：1667 –1674 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
香蕉根系均一化全长 cDNA 文库的构建和鉴定
1,4 1 3 2 1,2,*
王 卓 ，殷晓敏 ，王家保 ，徐碧玉 ，金志强
1 2
（中国热带农业科学院海口实验站，海口 570102 ； 中国热带农业科学院热带生物技术研究所，农业部热带生物技
3 4
术重点开放实验室，海口 571101 ； 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，海南儋州 571737 ； 海南大学，海
口570228 ）
摘 要：以香蕉幼苗根系为材料，利用 DSN （duplex-specific nuclease ）均一化技术与 SMART（switching
mechanismat 5′end of RNA transcript ）技术相结合，构建香蕉根系均一化全长cDNA 文库。经检测，初级
6 -1 6
文库滴度 1.1 × 10 cfu · mL ，库容 5 × 10 个独立克隆，重组率大于 95%，插入片段平均长度大于 1 kb，
表明文库质量较好。随机挑取 192 个克隆进行 EST （expressed sequence tags ）测序，成功获得 179 个高质
量 EST ，含 5 个 conting 和 174 个 singlet，冗余度仅为 2.35% 。小规模测序拼接后获得 145 个 unigenes ，
对 unigenes 分析结果表明文库的可靠性好。从序列比对结果中挑选 3 个与其它植物同源的抗逆基因，利
用 RT-PCR 方法进行了干旱、低温及盐胁迫条件下基因表达分析，结果显示这 3 个基因在不同的逆境下差
异表达。
关键词：香蕉；根系；均一化；cDNA 文库；基因；表达
中图分类号：S 668.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2011 ）09-1667-08
Construction and Characterization of Normalized Full-length cDNA
Library of Banana Roots
1,4 1 3 2 1,2,*
WANG Zhuo ，YIN Xiao-min ，WANG Jia-bao ，XU Bi-yu ，and JIN Zhi-qiang
1 2
（Haikou Experimental Station ，Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences，Haikou 570102，China；Institute of
Tropical Bioscience and Biotechnology，Chinese Academy
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