铝诱导蚕豆气孔保卫细胞凋亡研究.pdfVIP

农业环境科学学报 2010，29(9)：1659-1664 JournalofAgro—EnvironmentScience 铝诱导蚕豆气孔保-0flit胞凋亡研究 刘 鑫，仪慧兰 (山西大学生命科学学院，太原 030006) 摘 要：植物叶表面的气孔保卫细胞是研究信号转导的模式实验系统，对环境变化反应灵敏而准确，采用蚕豆叶面气孔保卫细胞， 研究了铝(A1C1，)对细胞的毒性效应。结果表明，在 1-10mmol·L-范围内，A1C1，可使气孑L保卫细胞活性降低，部分细胞死亡，且随着 浓度的增高细胞死亡率增高；死细胞呈现核固缩 、核降解、凋亡小体等典型凋亡特征。凋亡抑制剂Z-Asp—CH2一DCB或TLCK与 A1C1共同作用时，保卫细胞死亡率显著降低 ；一定浓度的抗坏血酸 (AsA)或过氧化氢酶 (CAT)以及 ca螯合剂乙二醇 四乙酸酯 (EGTA)或ca通道抑制剂LaC1，与A1C1，共同作用时，细胞死亡率降低。研究结果表明，铝诱导的蚕豆保卫细胞死亡可能是一种细 胞凋亡过程，由胁迫诱发的活性氧介导，通过激活质膜钙通道，引起胞内ca水平改变，进而介导细胞凋亡。 关键词：蚕豆；A1C13；保卫细胞；细胞凋亡 中图分类号：Q945．78 文献标志码 ：A 文章编号：1672—2043(2010)09—1659-06 AluminumInducesApoptosisinViciafabaGuardCells LIUXin，YIHui-lan (SchoolofLifeScience，ShanxiUniversity，Taiyuan030006，China) Abstract：Aluminum(A1)isthemostabundantmetallicelementintheearthscrust．Virtuallyallfood，water，air，andsoilcontainsomealu- minum．SincethetoxiceffectofA1onplantswasfirstdiscoveredin1918，ithasbeenfoundthatA1isamajorfactorreducingplantgrowth andcropproductioninacidsoils．However，themechanism ofA1toxicityisstillnotcompletelyclear．Stomatalguardcellsintheepidermisof plantleavesrespondtoenvironmentchangessensitivelyandaccurately，commonlyusedasamodelexperimentalsystem tostudysignaltrna s— duction．Inthisstudy，effectofaluminumonguardcellviabilitywasinvestigatedinViciafabaleaves．Youngfullyexpandedleavesfrom4一 week—oldplantswereusedasmaterials．Epidermalstripswereobtainedbypeelingoffthelowerepidemr isfrom youngfullyexpandedleaves． Theywereincubatedin2一(N—morpholino)ethanesulfonicacid(MES)buffercontainingsomechemicals(A1C13withorwithoutsomealle— viants)for3hat23℃ inwhitelightofrthetreatment．Afterthen，thestripswerestainedwithfluorescencereagentfluoresceindiacetate (FDA)，propidiumiodide(PI)，2，7-dichlorofluoresceindiacetate(DCFH—DA)andfluo-3acetomethoxyester(Fluo一3AM)，respectively， nadobservedunderafluorescencemicroscope．Theresuhsofthepresentstudyshowedhtataluminum treatmentsignificantlydecreasedcell viabilityandinducedcelldeathatconcentrationsof1，2．5，5mmol·L一and10mmol·L一