八章 吸光光度法.pptVIP

第8章 吸光光度法;8.1 概述; 按能量交换方向分 吸收光谱法 发射光谱法 按作用结果不同分 原子光谱→线状光谱 分子光谱→带状光谱;3．光谱法与非光谱法的区别：;四、吸收光谱 ;8.2 光吸收的基本原理;a 跃迁类型 价电子跃迁：σ→σ*, π→π*; n→σ*, n→π* ?E (h?) 顺序: n→π*π→π* n→σ*σ→σ* ;b 生色团和助色团 生色团: 含有π→π*跃迁的不饱和基团 例： C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N— ;助色团: 含非键电子的杂原子基团，如-NH2, -OH, -CH3… 与生色团相连时，会使吸收峰红移，吸收强度增强 例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X;物质的颜色;8.2.3 朗伯-比尔定律; 当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律 －－－光吸收定律 数学表达：A＝lg(1/T)=Kbc 其中，A:吸光度，T:透射比， K:比例常数，b:溶液厚度，c:溶液浓度;摩尔吸光系数 e;桑德尔(Sandell)灵敏度： S 当仪器检测吸光度为0.001时，单位截面积光程内所能检测到的吸光物质的最低含量。 单位：mg/cm2 S=M/e ;氯磺酚S测定钢中的铌 50ml容量瓶中有Nb30μg，用2cm比色池，在650nm测定光吸收，A＝0.43,求S. (Nb原子量92.91)。 有两种做法：根据A=εbc,求ε;吸光度的加和性;光源;常用光源;单色器 作用:产生单色光 常用的单色器：棱镜和光栅;检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器： 光电管 光电倍增管 光二极管阵列;目视比色法—比色管 ;8.3.2 吸收光谱;半郑块法辫寞汰互蜗揣皂筋裤祟拌埃勿含角屡曼兴贬壬嫡糙甜洞炉舍衬不八章 吸光光度法八章 吸光光度法;8.4 显色反应及影响因素;氧化还原反应;成盐反应 ;吸附显色反应 达旦黄测定Mg(II),Mg(OH)2吸附达旦黄呈红色 ;2 显色剂;三苯甲烷类 三苯甲烷酸性染料 铬天菁S ;邻菲罗啉类：新亚铜灵 ;3 多元络合物;8.4.2 影响显色反应的因素;2 显色剂的用量;5 溶剂;8.5 吸光光度分析设计;8.5.1 吸光度测量的条件选择;注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和界面反射等因素对透光率的干扰;参比溶液的选择一般遵循以下原则：;8.5.2 标准曲线制作;8.6 吸光光度法的误差;8.6.1 非单色光引起的偏移;非均匀介质 胶体，悬浮、乳浊等对光产生散射，使实测吸光度增加，导致线性关系上弯;偶般眶殖辽榆萧毡颂薄葫押朗廓苑黔刁亥月抒歉蹄香门翻坐低再伶贱埋翰八章 吸光光度法八章 吸光光度法;8.6.3 吸光度测量的误差;若不再此范围：1、改变比色池厚度 2、改变待测液浓度;示差吸光光度法 目的：提高光度分析的准确度和精密度 解决高(低)浓度组分(i.e. A在0.2~0.8以外)问题 分类：高吸光度差示法、低吸光度差示法、 精密差示吸光度法 特点： 以标准溶液作空白 原理： A相对 = ?A = ?bcx- ?bc0= ?b? c 准确度：读数标尺扩展, 相对误差减少, c0愈接近cx, 准确度提高愈显著;示差分光光度法（示差法）原理 示差法需要较大的入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。 设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cscx)。则： Ax= ?bcx As= ?bcs ΔＡ＝Ａx －Ａs = ?b(cx－cs）= ?bΔc ; 示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx： cx =cx测 + Δc 示差法标尺扩展原理：;