实验一. 光学显微镜的构造和使用方法，细胞的基本形态与结构，细胞的 ....PDFVIP

实验一. 光学显微镜的构造和使用方法，细胞的基本形态与结构，细胞的化学成 分分析： 一. 光学显微镜的构造和使用方法： 这一章节最重要的是显微镜的使用方法，油镜的使用不用讲。 细胞器的观察和细胞的亚微结构： 发片：兔脊高尔基体、小鼠线粒体、蛙卵母细胞 二. 细胞的基本形态与结构： （一）人口腔粘膜上皮细胞(自制涂片)： (1).用牙签在自己口腔面颊部的粘膜上刮取少许上皮细胞，涂抹在洁净 的载玻片上，使其均匀分布。 (2).加一滴0.25%次甲兰溶液,进行染色，然后盖上盖玻片，盖片时先使 玻片一边触及液体，然后将另一边慢慢放下。注意两玻片之间不能有气 泡，否则，必须将盖玻片拿起重放。 制备这种临时标本，需加水滴成药 液的量应刚好充满载玻片和盖玻片之间，如加得太多，液体会从盖玻片 边缘溢出，盖玻片容易浮动，这时可用吸水纸从盖玻片一边将水液吸去 少许。如果液体太少，两玻片间会有空气进入，可用吸管加少许水液于 盖玻片的边缘，使其自然流进盖玻片下面。 （3）将制成的临时标本置显微镜下观察，先用低倍镜找到物象，然后选 择较清楚、完整的细胞作高倍镜观察。观察时应将镜台放平，否则玻片 易滑动，水液可能沾污镜台。结果：高倍镜下，口腔粘膜上皮细胞呈不 规则的多面体，表面有一层纤薄的细胞膜，内部有染成深蓝色的细胞核， 细胞核与细胞膜之间充满细胞质。 （二）示教： 1． 脊髓神经细胞 2． 平滑肌细胞 3． 血涂片 4． 小鼠肝细胞 三．细胞的化学成分与分析： （一） 可溶性糖类———斐林（Feiling）试验： 1．原理：单糖和双糖可以溶解状态包含于活细胞中。含有自由醛基（—CHO） 或酮基（ C=O）的单糖或某些双糖，具有还原能力，在硷性溶液中能将金 属离子（例如铜、汞、银等）还原，糖本身被氧化成酸类化合物。将硫酸铜与硷 溶液混合加热，如同有还原糖存在，则产生黄色或红色的氧化亚铜沉淀。 2．方法与步骤： 用刀片作梨的徒手切片，挑选最薄的一片放在载玻片上，在切片上滴加新 鲜配制的斐林溶液。将载玻片在酒精灯上加热至沸腾。盖上盖玻片，镜检。 3．结果：细胞出现红色颗粒的氧化亚铜沉淀，证明有可溶性糖类的存在。 （二） 淀粉———碘反应： 1． 原理：淀粉是唯一遇碘液出现兰色的物质。这种颜色在加热时消失， 冷却时又重复出现。兰色的发生是由于形成不稳定化合物——碘化 淀粉的缘故。各种植物细胞中淀粉粒外形是极其多样的，它们可以 呈球形、椭圆形、多角形、杆形等等。 2． 方法与步骤： 用刀片作马铃薯的徒手切片，挑选最薄的一片放在载玻片上，加一 滴革蓝 (Cram) 氏碘液，可见切片立即染成兰色。盖上盖玻片，在 低倍镜下观察。 3． 结果：马铃薯多角形的薄壁细胞中有许多被染成兰色的椭圆形的淀 粉粒。 (三)糊粉粒——碘反应 1．原理：糊粉粒于见于某些种子的胚乳细胞中，内含蛋白质的结晶体， 是最有营养价值的贮藏养料，碘——碘化钾溶液能将糊粉粒染成不同深浅的黄颜 色。 2．方法与步骤 作蓖麻子的徒手切片，挑选较薄的切片放在载玻片上，加一滴革兰氏碘 液，盖上盖玻片，.镜检. 3. 结果:细胞内充满了黄色的结晶颗粒,那是被染色的蛋白质糊粉粒. (四)过氧化氢酶分解过氧化氢实验 1． 原理：过氧化氢酶可以分解过氧化氢,由于产物中有氧气放出，因此 可以形成气泡。利用过氧化氢溶液可以来检测过氧化氢酶的存在。 2． 方法与步骤 用刀片刮取生的马铃薯和熟的马铃薯，分置于载玻片的两端，然后在两者上 各滴加少量的2%过氧化氢溶液，观察现象。 3. 结果：生马铃薯加过氧化氢后有气泡产生、证明其中有过氧化氢酶 存在。熟的马铃薯加过氧化氢