改进的18Ｏ同位素标记法标记蛋白质多肽论文.docVIP

　　改进的18Ｏ同位素标记法标记蛋白质多肽论文 赵焱 卢庄 贾伟 应万涛 钱小红 【摘要】 针对18Ｏ同位素标记反应两个重要影响因素——肽段分散度和胰酶灭活方法，进行了标记条件的改进和灭活方法的优化。在H218Ｏ中加入RapigestTM SF助溶剂并微波辅助加热，使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进（18Ｏ/16Ｏ 峰面积比值 99%）。标记后，对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活，使标记后的肽段稳定性显著提高，放置6 d不发生回交反应。对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后的质谱实验结果表明：优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽。 【关键词】 18Ｏ同位素标记；多肽；蛋白质组 Abstract In order to optimize the18Ｏ labeling method，ticroical modification ide(IAA) resulted in trypsin deactivated pletely.No significant back-exchange from 18Ｏ to16Ｏ ent result ixture from shoproved method could be effectively used to label protein and peptide. Keye 1 引言 定量蛋白质组学通过批量观察