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* * 第十三章 酶活力的调节 P266 第一节 酶的抑制作用 第二节 别构酶的调节 酶活力调节 的2条途径 调节酶蛋白的合成（慢调） 改变Vm或Km Vm主要改变Ko(kcat)， 即改变酶的转换率（TN） Km主要改变酶和底物的 亲和力，影响反应速度 调节酶分子的催化效率（快调） 增加 / 降低酶活性 激活剂 抑制剂 金属离子 酶原激活 2大类抑制作用 不可逆抑制作用 可逆抑制作用 别构调节 第一节 酶的抑制作用 P267 比较： 酶的抑制作用（inhebition） 酶的失活 (inactivation) 去激活作用(deactivation) 抑制剂直接与酶（必需基团）发生作用，改变构象，酶活降低。 酶蛋白变性引起。 引起此作用的化合物与激活剂作用，而不直接与酶作用。 如： 金属离子Mg是酶的激活剂，而EDTA与Mg结合后，导致酶活降低。 一、抑制作用的分类 P267 不可逆抑制 I与酶活性中心必需基团以共价键结合, 不能用透析方法去除。 可逆性同位抑制 I与E的活性中心基团以非共价键结合, 可以用透析方法去除。 同位抑制 I—E结合或 I-S-E结合， 从而阻止S→P。 （I与E结合的 部位与S相似。） 别位抑制 I结合在E活性中心以外， 通过改变E的 空间构象影响酶活。 （如别构抑制作用。） 分 类 二、可逆同位抑制 P267 用动力学方法将可逆同位抑制分为4类 混合性抑制 竞争性抑制 反竞争性抑制 非竞争性抑制 （一）抑制动力学通用公式 E + S ES E + P + + I I EI + S EIS Ks Ks` Ki Ki` 只有ES复合物产生P； Ks是ES→E+S的解离常数； Ks`是EIS→EI+S的解离常数； Ki是EI →E+I 的解离常数； Ki`是EIS →ES+I 的解离常数； 根据米氏公式，推倒得： 可逆同位抑制通式：P268 （13）米氏式 （14）双倒数式 4种抑制作用的不同，仅在于Ki和Ki`两个数值不同。 （二）竞争性抑制作用 P268 1.特点 I与S对E的结合有竞争作用，E只能结合二者之一； 不能形成E-I-S三联复物； Ki`和Ks`的值无穷大∞。 E + S ES E + P Ki Ks + I EI 有I 时，形成EI； [I]越大，[ES]、P 越少； 增加[S]，ES增加； [S]足够大，I 不表现抑制作用。 2.速度公式和双倒数图 P269 无[I] 有[I] 1/ Km(1+[I]/Ki) 与无抑制剂的速度公式比较： 表观Km大于无I；（与S亲和力减小） 当[S]无限大时， Km(1+[I]/Ki)忽略不计，v=Vm ； (最大反应速度不变) 双倒数图特点： 有I，直线斜率增大；[I]越大，斜率越大； 无论有无I存在，各线相交于纵轴。 3.竞争性抑制的机制 P 270 I 的化学结构与S相似，能结合在酶活性中心的底物结合位点，从而阻断S与E结合。（最主要） 例1 化合物的结构和底物相似： 酪氨酸蛋白激酶（TPK） 底物类似物 L－氮酪氨酸 底物 L－酪氨酸 可能用于抑制有TPK活力的生长因子受体，用于恶性肿瘤治疗。 例2 化合物平面结构和S不类似，但立体构象十分相象 ： 肽多糖 末端D－丙氨酰－D丙氨酸 （S） 肽－肽交联 革兰氏阳性菌的外壁肽多糖 青霉素－（6氨基青霉烷酸） （立体构象相似S） 肽多糖 转肽酶 阻断肽多糖的合成，达到杀菌目的。 例3 化合物与过渡态（S＋）类似，竞争作用更大 ： 丙酮酸羧化酶 草酰乙酸脱羧酶 乳酸脱氢酶 烯醇式丙酮酸 （共同的过渡态） 草酸 （过渡态类似物） 强烈抑制3种酶 － 例4 化合物结构与S结构不相似，也表现竞争性抑制： 醇脱氢酶 腺苷酸激酶 NADH（底物） ATP(底物) 水杨酸 （—） 与