真核基因表达调控2011.ppt

* rRNA化学修饰：甲基化 原核生物：碱基甲基化 真核生物：核糖甲基化 tRNA基因转录时也可能先生成前体tRNA，然后再进行加工成熟。一般认为，tRNA基因的初级转录产物在进入细胞质后，首先经过核苷的修饰，生成4.5S前体tRNA，再行剪接成为成熟tRNA（4S）。 * 2、mRNA的加工成熟 hnRNA确定是mRNA前体的证据 * hnRNA确定是mRNA前体的证据 ①在真核生物细胞核中发现存在代谢十分活跃、平均相对分子质量为2×107，长度不均一的RNA，而细胞质中mRNA的平均相对分子质量仅为1.5×106。 ②hnRNA很不稳定，半衰期只有5～15min，而真核生物mRNA的半衰期一般都比较长，这说明hnRNA不可能是转录的最终产物，而只能是中间产物。 ③用放射性同位素作脉冲标记证明，75%被标记的RNA是hnRNA。这些标记的RNA大部分位于核内，只有10%进入细胞质，所以认为它们是mRNA的前体。 ④hnRNA占细胞全部RNA的3%，说明它一经诞生就立即加工变化，不会长久积累下来。 ⑤hnRNA 3’末端也带有多聚（A）。 ⑥加入dAR（脱氧腺嘌呤核苷）抑制多聚（A）的生物合成，hnRNA和mRNA的合成都受到抑制。 * 3、真核生物基因转录后加工的多样性 真核生物的基因可以按其转录方式分为两大类：即简单转录单位和复杂转录单位。 (1) 简单转录单位。这类基因只编码产生一个多肽，其原始转录产物有时需要加工，有时则不需要加工。这类基因转录后加工有3种不同形式： * * (2) 复杂转录单位。含有复杂转录单位的主要是一些编码组织和发育特异性蛋白质的基因，它们除了含有数量不等的内含子以外，其原始转录产物能通过多种不同方式加工成两个或两个以上的mRNA。 * ①利用多个5’端转录起始位点或剪接位点产生不同的蛋白质。 * * ②利用多个加多聚（A）位点和不同的剪接方式产生不同的蛋白质。 * ③虽无剪接，但有多个转录起始位点或加多聚（A）位点的基因。 虽然原始转录产物的蛋白质编码区和3’末端都相同，不同的5’末端却导致了分泌型和胞内型蛋白的产生，其中分泌型蔗糖酶是可调节的，而胞内型则是组成型的。 * 7.5.2 翻译水平的调控 一.mRNA运输控制（transport control）是对转录本从细胞核运送到细胞质中的数量进行调节; 二．mRNA翻译的控制 三．mRNA的结构和翻译的效率 四．翻译的起始调节 五．选择性翻译 六．反义RNA调控 七．翻译的自我调节 * 1、mRNA的稳定性与基因表达调控 真核生物能否长时间、及时地利用成熟的mRNA分子翻译出蛋白质以供生长、发育的需要，是与mRNA的稳定性以及屏蔽状态的解除密切相关的。 原核生物mRNA的半衰期很短，平均大约3分钟。高等真核生物迅速生长的细胞中mRNA的半衰期平均约为3小时。在高度分化的终端细胞中许多mRNA极其稳定，有的寿命长达几天或十几天，加上强启动子的转录，使一些终端细胞特有的蛋白质合成达到惊人的水平。 * * 例2： 转运铁蛋白受体（TfR）和铁蛋白负责铁吸收和铁解毒。这两个mRNA上存在相似的顺式作用元件，称为铁应答元件（iron response element，IRE）。 IRE与IRE结合蛋白（IREBP）相互作用控制了这两个mRNA的翻译效率。当细胞缺铁时，IREBP与IRE具有高亲和力，两者的结合有效地阻止了铁蛋白mRNA的翻译，与此同时，TfR mRNA上3非翻译区中的IRE也与IREBP特异结合，有效地阻止了TfR mRNA的降解，促进TfR蛋白的合成。 * * 2、 蛋白质因子的修饰与翻译起始调控 用兔网织红细胞粗抽提液研究蛋白质合成时发现，如果不向这一体系中添加氯高铁血红素，网织红细胞粗抽提液中的蛋白质合成抑制剂就被活化，蛋白质合成活性在几分钟之内急剧下降，很快就彻底消失。 现已查明，网织红细胞蛋白质合成的抑制剂HCI是受氯高铁血红素调节的eIF-2的激酶，可以使该因子的α-亚基磷酸化并由活性型转变为非活性型。 * * 在蛋白质生物合成的过程中，特别是在起始反应中，mRNA的“可翻译性”是起决定作用的，其5’末端的帽子结构、二级结构、与rRNA的互补性以及起始密码附近的核苷酸序列都是蛋白质生物合成的信号系统。 蛋白质生物合成的调控，就是通过mRNA本身所固有的信号与可溶性蛋白因子或者与核糖体之间的相互作用而实现的。 * 在蛋白质生物合成的过程中，特别是在起始反应中，mRNA的“可翻译性”是起决定作用的，其5’末端的帽子结构、二级结构、与rRNA的互补性以及起始密码附近的核苷酸序列都是蛋白质生物合成的信号系统。 蛋白