第八章动物实验基本操作方法.pptVIP

第八章 动物实验的基本操作方法 第二节 实验动物的麻醉方法 第三节 实验动物被毛的去除方法 第四节 实验动物的给药途径和方法 第五节 实验动物的采血方法 第六节 实验动物常用手术方法 第七节 实验动物的处死方法 ⒉ 兔的静脉注射 一般采用外耳缘静脉。 给兔注射前，先将兔放入固定盒内固定好，拔去注射部位的毛，用75%的酒精消毒，手指轻弹兔耳，使静脉充盈。左手食指和中指夹住静脉的近心端，拇指绷紧静脉的远心端，环指及小指垫在下面，右手持注射器，尽量从静脉的远心端刺入血管，回一下血，放松对耳根处血管的压迫，移动拇指于针头上以固定，放松示、中指，将药液注入。注射完毕，用棉球压住针眼，拔去针头，继续压迫数分钟。如需反复注射，应尽量从耳的末端开始。 ⒊豚鼠的静脉注射 一般采用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉或者浅背侧足中静脉注射，此外豚鼠的耳缘静脉也可注射。豚鼠的静脉管壁较脆，注射时应特别小心。 ⒋犬的静脉注射 犬的静脉注射多采用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉。注射部位剪毛后，用碘酒和酒精消毒皮肤，在静脉血管的近心端用橡皮带扎紧，使血管充盈，从静脉的远心端将注射针头平行刺入，如有回血，即可松开橡皮带，将药缓缓地注入。 三、其他途径给药 ⒈呼吸道给药 呈粉尘、气体等状态的药物，均需要通过呼吸道给药。如给动物乙醚作吸入麻醉，用锯末烟雾制作慢性支气管炎动物模型等。 ⒉皮肤给药 常用于鉴定药物或毒物经皮肤的吸收作用、致敏作用等。对兔和豚鼠，常采用背部一定面积的皮肤脱毛后，将一定的药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。 ⒊直肠给药 常用于动物麻醉。兔直肠内给药时，常采用灌肠用的胶皮管或114号导尿管进行给药。 ⒋脑内给药 常用于微生物动物实验，将病原体等接种于被检动物脑内。 四、实验动物用药量的确定 ⒈先用小鼠粗略的探索出中毒剂量或致死剂量，然后用小于中毒剂量，或取致死量的若干分之一为应用剂量，一般可取1／10～1／5。 ⒉植物药粗制剂的剂量多按生药折算。 ⒊化学药品可参考化学结构相似的已知药物，特别是化学结构和作用都相似药物的剂量。 ⒋确定剂量后，动物也没有中毒的表现（如体重下降、精神不振、活动减少或其他症状），可以加大剂量再次实验。如出现中毒现象，作用也明显，则应降低剂量再次实验。 ⒌用大动物实验时，开始的剂量可采用给鼠类剂量的1／15～1／2，以后可根据反应调整。 ⒍确定动物给药剂量时，要考虑动物的年龄和体质状况。 ⒎确定动物给药剂量时，要考虑给药途径不同，所用剂量也不同。以口服量为100时，灌肠量应为100～200，皮下注射量为30～50，肌肉注射量为25～30，静脉注射量为25。 一、大、小鼠的采血方法 （一）尾部采血 1．剪尾采血 需血量少时常采用本法。用手轻揉，或侵入45°水中数分钟，也可用二甲苯涂擦鼠尾，使尾部血管充盈。消毒后，用无菌纱布擦干，将尾尖剪去约5mm，从尾根向尾尖推挤，即可收集到少量血液。用此法每只鼠一般可采血10余次。小鼠每次可采血0.1ml，大鼠约0.4ml。 2．切割尾动脉或尾静脉 用锋利刀在尾静脉或尾动脉切开一小口，血液自行流下，几条血管可从鼠尾交替切割。此法主要适应于大鼠。 3．尾静脉穿刺 方法同大、小鼠的尾静脉注射给药。此法主要适应于大鼠。 （二）眼眶后静脉丛采血 用7~10cm长的玻璃取血管，将其尖端折断，使其锋利。将取血管浸入1%的肝素溶液，干燥后使用。采血时，左手拇指及食指抓住鼠耳之间的皮肤使鼠固定，并轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。右手持取血管，将其尖端插入内眼角与眼球之间（如图所示），轻轻向眼底方向刺入，小鼠刺入2~3mm深，大鼠刺入4～5mm深，当感到有阻力时即停止刺入，旋转取血管以切开静脉丛，血液即流入取血管中。 采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。亦可同时用消毒纱布轻压眼部片刻，同一动物可反复交替穿刺双眼多次。小鼠一次可采血0.2~0.3ml，大鼠一次可采血0.5～1.0ml。 (三)心脏采血 ⒈穿刺法 麻醉，固定，消毒皮肤。在左胸3～4肋间用左手食指摸到心搏最强处，右手持注射器垂直胸壁由此进针，插入心脏，心脏采血时，动作要迅速，缩短留针时间，以防止血液凝固。 ⒉开胸法 打开胸腔，直接从见到的心脏内抽血。亦可剪破心脏，直接用注射器或吸管吸血。 （四）大血管采血 把麻醉的动物固定好，分离暴露颈静脉、颈动脉或股动脉、股静脉，用注射器穿刺抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。