生药资源的开发利用.ppt

内容提要 我国生药资源概况 生药资源开发的途径 生药资源的应用 生药资源的保护 附录：我国的道地药材 4、从海洋生物中开发 我国仅植物资源就异常丰富, 经查明的高等植物就有3 万余种, 而实际上我们目前开发出来作为中药材的仅占其中的1/5 不到, 植物化学成分和药用价值方面的研究仅仅涉及极少的种类。目前,“向海洋生物中开发新药”已成为沿海各国药学研究的新方向。我国海洋生物资源十分丰富, 国家一类新药如藻酸双酯钠(PSS) 及海豚毒素、鱼油已开发成功, 使其显示出诱人的开发前景。 5、从传统中药加工工艺中开发 中药材的加工炮制工艺是在不断发展的, 弄清加工炮制原理及其对化学、药理和临床的影响, 并进一步开发改进, 可充分提高药材疗效, 充分发挥药材作用。 如：丹皮的传统加工方法是采收牡丹根后, 将芯抽去, 只以皮入药。经分析丹木的化学成分及药理作用与皮基本一致, 可以全根入药。 提取生药的有效成分、有效部位 以生药中天然成分为原料进行半合成或结构修饰 现代生物技术在生药资源开发中的应用 生药资源多方向开发利用 1.提取生药有效成分、有效部位 从植物等天然原料中直接提取有效成分、有效部位作为制药原料，是当前国内外开发天然药物和中药现代化的重要途径之一。提取的植物品种在300种以上。 如： 青蒿 ——— 青蒿素 黄连 ——— 黄连素 3 现代生物技术在生药资源开发中的应用 基因工程的应用 DNA指纹图谱技术 利用基因工程生产植物次生代谢产物 利用转基因动物, 生产动物类中药 DNA指纹图谱技术 作为现代分子生物学技术重要手段的DNA分子遗传标记方法,从居群和分子水平上揭示中药材的生物学实质。 任何生物物种或个体都具有特定的DNA多态性,DNA分子作为遗传信息的载体,所含信息量大,且具有较高的遗传稳定性和化学稳定性,因此通过直接诊断分析DNA的多态性可以避开遗传特性表现过程中的环境因素、数量性状遗传或部分与完全显性的干扰,从分子水平上揭示药材的道地性。 可用于中药材鉴定的DNA指纹图谱技术有4大类: 1）基于传统的Southern杂交技术的分子标记如RFLP 2）基于PCR反应的分子标记如RAPD,DAF等 3）PCR-RFLP技术的结合即AFLP技术 4）DNA测序分析技术。 近年来,还发展了基于DNA barcoding(条形码)技术,该技术在药用植物 鉴定中具有独到的优势。 1、RFLP:限制性片段长度多态性标记技术 RFLP是第一个被应用于遗传研究的DNA分子标记技术。 限制性内切酶能高度专一地识别和切割DNA序列,不同酶识别不同的DNA序列,因此可利用内切酶的酶解产生不同长度的DNA片段,从而揭示DNA序列水平上的多态性。酶解后的分子量大小不同的DNA可通过凝胶电泳来分离,再将已分离的DNA与放射性核试验素或荧光标记的核酸探针分子杂交,便可获得信息量大、分辨率高的DNA指纹图。 RFLP方法技术步骤繁琐,费时费力,应用不便。 2、RAPD：随机扩增多态性DNA标记 采用任意顺序的较短的引物扩增基因组DNA,可以在不知道特异DNA序列的情况下,检测DNA的多态性。虽然对每一个引物而言，其检测的基因DNA多态性是有限的，但可用的引物数很多，可检测区域几乎覆盖了整个基因组，从理论上讲，RAPD可以对整个基因组DNA进行多态性检测。 RAPD技术目前广泛用于中药DNA指纹图谱的构建。 PCR技术使目的基因极易获得,再与RFLP联用,还产生了PCR-RFLP、RAPD-RFLP等方法 RAPD技术的一般步骤如下： 3、AFLP：扩增片段长度多态性DNA 该方法用一人工接头(adapter)与限制酶切的基因组DNA片段连接,制成AFLP模板DNA,合成一系列3c-末端随机改变数个碱基的PCR引物进行PCR特异条件的扩增,经电泳分离检测后可得到DNA指纹图谱。一次实验可检测约50~100个扩增产物,与RFLP、RAPD比较,AFLP法构建的DNA指纹图谱具有效率高、重复性好、灵敏度高的优点,而且所检测到的大多数扩增片断与基因组的单一位置对应,展示了AFLP技术特别适合品种鉴定的应用价值和广阔前景。 4、DNA 测序分析 是对目的基因的DNA序列分析的基础上，采用PCR-RFLP、突变等位基因（Mutant Allele Specific Amplification,MASA），以及AS-PCR法对药材进行鉴定。DNA直接测序具有可在严重降解的药材DNA中扩增出特定的序列片段，具有较高的重复性和稳定性；避免因药材的特性造成的误差，具有高度的专属性。 利用基因工程生产植物次生代谢产物 植物次生代谢产物