生物技术在其他方面的应用 导学案.doc

生物技术在其他方面的应用最新考纲 ．植物的组织培养蛋白质的提取和分离技术的基本操作和应用从生物材料中提取某些特定的成分考纲解读植物组织培养的基本过程及其在生产中的应用血红蛋白的提取和分离的实验原理和方法技术与生物体内DNA复制的区别初步学会用水蒸气蒸馏法和压榨法提取植物芳香油知识点一　植物的组织培养技术 　比一比：MS培养基与微生物培养基有何主要不同？　看一看：植物组织培养与花药培养技术有何相同与不同？知识点二　蛋白质的提取和分离、PCR技术　思一思：用猪的血液与鸡的血液提取血红蛋白哪个效果更好？ 想一想：PCR与生物体内DNA复制有何区别？知识点三　植物有效成分的提取　议一议：水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏的区别。一、植物组织培养的过程菊花组织培养过程菊花组织脱分化,Ｆ形成愈伤组织再分化,Ｆ长出丛芽―→生根移栽,Ｆ菊花植株。月季的花药培养 二、菊花茎与月季花药组织培养的比较 菊花茎的组织培养 月季花药组织培养 理论依据 植物细胞的全能性 植物细胞的全能性 材料选取 未开花植株茎上部新萌生的侧枝 完全未开放的花蕾 光照状况 每日用日光灯照射12 h 开始不需要光照，幼小植株形成后需要光照 操作流程 制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育 影响因素 选材、营养、激素、pH、温度、光照等基本过程 脱分化、再三、植物激素在组织培养过程中的重要作用生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为：在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。使用顺序不同，结果不同，具体如下：使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高3.用量比例不同，结果也不同的比值 1．引物是指能够与DNA母链的一段碱基序列互补配对的一小段DNA或RNA。聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。影响萃取的因素(1)主要因素：萃取剂的性质和使用量。(2)次要因素：原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件。萃取过程注意事项(1)由于有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃2)为防止加热时有机溶剂挥发，还要在加热瓶口安装回流冷凝装置。多聚酶链式反应扩增DNA片段细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR技术)的比较 细胞内DNA复制 PCR 不同点 解旋 解旋酶，边解旋边复制 80～100 ℃高温解旋，双链完全分开 酶 解旋酶，DNA聚合酶，DNA连接酶 聚合酶 引物 RNA DNA或RNA 能量 ATP 不加 温度 体内温和条件 高温 子链合成 一条链连续(先导链)，另一条链不连续，先合成片段，再由DNA连接酶连接(滞后链) 两条子链均连续合成 相同点 ①提供DNA模板四种脱氧核苷酸作原料子链延伸的方向都是从5′端到3′端2.PCR反应的过程及结果(1)PCR反应过程：变90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链，如图： ②复性：系统温度下降至50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图： ③延伸：当系统温度上升至72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、G、C)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图： (2)结果：一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性、复性、延伸三DNA序列呈指数扩增。提醒　DNA复制需要引物的原因：DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。血红蛋白的提取和分离方法及原理方　法 原　理 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 电泳法 各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同2.实验操作程序(1)样品处理红细胞的洗2)粗分离原理：透析袋能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内，透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质。②过程：取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液中(pH为7.0)，透析12 h。目的图示：注意：透析时间为12 h。透析袋是用硝酸纤维素制成，小分子可自由进出，而大分子保留在袋内。(3)纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。(4)纯度鉴定：一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。结果分析与评价项 分　析 血液样品的处理 分层明显→样品处理完成 凝胶色谱柱的装填 放一支与凝胶柱垂直的日光灯→直接检查加入大分子有色物质如蓝色葡聚糖—2 000或红色葡聚糖，若色带均匀、狭窄、平整→装填成功 血红蛋白的分离 血红蛋白的红色