结核感染T细胞检测.ppt

1、结核病的疫情 结核病是一种慢性传染病，可在身体各个器官发病，其中以肺结核最为常见，因此肺结核病是一种严重危害人类健康的传染病，得了肺结核病如果不能彻底治疗就会完全丧失劳动能力，而且还会传染他人，对个人、家庭和社会都是极大的危害。 我国是全球22个结核病高负担国家之一，活动性肺结核病人数仅次于印度，居世界第二位。结核病仍是目前严重影响我国人民健康的公共卫生问题，而且影响到社会和经济的发展，是我国重点控制的疾病之一。 T-SPOT.TB技术： 利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异 抗原刺激后分泌γ干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放γ干扰素的T淋巴细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个分泌细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。 空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效 T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs 5. T-SPOT.TB的临床意义 T-SPOT.TB高灵敏度 T-SPOT.TB高特异性 检测所用的ESAT-6＆CFP 10抗原均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域，RD1区基因仅存在于结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）。 卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因 因此 T-SPOT.TB不会受卡介苗或者非结核分枝杆菌影响。 6.结论 T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今天， T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。 基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点， T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。 研究生：赵飞骏 导 师：吴移谋 专 业：病原生物学 病原生物学研究所2002级硕士研究生论文答辩 梅毒螺旋体外膜蛋白核酸疫苗的筛选构建及其免疫效果的比较研究 Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo 研究生：赵飞骏 导 师：吴移谋 专 业：病原生物学 病原生物学研究所2002级硕士研究生论文答辩 梅毒螺旋体外膜蛋白核酸疫苗的筛选构建及其免疫效果的比较研究 Company Logo Company Logo 新检验项目 结核感染特异性T细胞 （T-SPOT.TB）检测技术 1.3 结核诊断 2 结核诊断 细菌培养 不能区分非结核分 枝杆菌 敏感度低，近半肺结核阴性 肺外结核取材难 结核杆菌生长缓慢，培养周期长，不利于早期诊断 3.TSPOT检测原理 结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞。 当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放γ干扰素 γ干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子。 Dominguez et al Clin Vacc Immunol 2008; 15;168-71 32 在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为94%。 Janssens et al ERJ 2007；30(4):722-8 58 经培养确诊、抗痨治疗不超过2周的结核患者用T-SPOT.TB检测，阳性率98%（57/58）。 Kim et al. Am J Med 2009；122, 189-195 186 在免疫力正常和免疫力低下的受试人群中，T-SPOT.TB的灵敏度分别为94%和95%。所有受试者中，42%为肺外结核患者。 Kim et al. Arch Intern Med. 2007; 167;20:2255-2259 32 在确诊的肺结核患者和疑似肺外结核患者中，T-SPOT.TB的阳性率94%。 Kang et al Chest. 2007 Sep;132(3):959-65 140 在经痰培养或肺部病变组织病理活检确诊的结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为92%。 Clark et al. Clin. Exp. Imm. 2007; 150(2):238-44 30 在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有临床症状和抗痨治疗有效）中，T-SPOT.TB的灵敏度为90.3%，并且不受CD4细胞数量影响。 Lee et al. ERJ 2006; 28:24–30 87