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第十二章核酸的合成2
逆转录酶是( )聚合酶。 A.以DNA为模板的RNA B.以RNA为模板的DNA C. 以RNA为模板的RNA D.以DNA为模板的DNA 2、(中国科学院02年)在DNA 损伤修复中,哪一种修复可能导致高的变异率( ) A、光修复 B、切除修复 C、重组修复 D、诱导修复 下列关于DNA复制,说法正确的是: A.按 3→5方向进行 B.需要DNA聚合酶Ⅰ C.需要DNA连接酶的作用 D.需要4种dNMP的参与 1、(南京师大 2000年 )简述原核生物DNA复制叉上进行的基本活动。 2、(南京师大 2001年) 比较原核生物与真核生物转录后加工的异同点。 3、(西南农大2000年)简要说明原核细胞中DNA复制与RNA的生物合成有何不同? 4、(上海师大2000年)如果下面的DNA双螺旋从左向右进行转录,指出哪条链是有意链,并写出转录产物的顺序。 5’-A-T-C-C-G-A-G-C-T-A-A-3’ 3’-T-A-G-G-C-T-C-G-A-T-T-5’ * * * * * * * * * * 可见,-35序列提供RNA聚合酶识别的信号,-10序列则有助于DNA局部双链的解开,两者共同决定了启动子的强度,也调控了转录的速度和RNA分子数。因此,-10和-35序列都很重要。同时有研究表明:离开共同顺序较远的启动子的活性亦较弱;破坏启动子功能的突变中有75%都是改变了共同顺序中的碱基,其余25%亦为离共同顺序较近顺序中的碱基的改变。 原核生物启动子的序列长约20-200bp不等。E.coli典型的启动子结构(80bp)如下: 原核生物亦有少数启动子缺乏这两个序列(-35和-10)之一。在这种情况下,RNA聚合酶往往不能单独识别这种启动子,而需要有辅助蛋白质的帮助。 结合位点 TGTTGACA TATAAT 起始位点 …10~18bp… …5~8bp… -35序列 -10序列 CAP-cAMP 不对称转录—— 只能以双链中固定的一条链(模板链)为模板转录RNA 开始 1.RNA聚合酶延DNA链移动,识别转录起点(启动子) (启动子) 打开螺旋,形成聚合酶-DNA-RNA复合体。 2.复合体甩掉δ亚基,随RNA聚合酶移动连续5`→3`转录RNA链。 17bp 螺旋解开长度 12bp DNA-RNA复合体长度 3.DNA螺旋前开、后合,RNA长长,不断脱离DNA。 (终止子) 4.识别终止信号(终止子),结束转录,各自分离。 由全酶在启动子附近将DNA局部解链,约解开17个碱基对。(酶与启动子结合的部位是AT富集区,有利于解链)? 第一个核苷三磷酸(常常是GTP或ATP)结合到全酶上,形成“启动子-全酶-核苷三磷酸”三元起始复合物。 第二个核苷酸参入,连结到第一个核苷酸的3羟基上,形成了第一个磷酸二酯键。 s因子从全酶上掉下,又去结合其它的核心酶。 二. 原核生物转录 2.转录过程-转录启动 当s因子从核心酶上脱落后,核心酶与DNA链的结合变得疏松(依靠其蛋白质的碱性与酸性核酸之间的非特异性的静电引力),可以在模板链上滑动,方向为DNA模板链的 3′→ 5′,同时将核苷酸逐个加到RNA链的3-OH端,使RNA链以 5′→ 3′方向延伸。 二. 原核生物转录 2.转录过程-链的延伸 DNA上的解螺旋区:在RNA链延伸的同时,RNA聚合酶继续解开它前方的DNA双螺旋,暴露出新的模板链,而后面被解开的两条DNA单链又重新形成双螺旋,DNA上的解螺旋区保持约17个碱基对的长度。 二. 原核生物转录 2.转录过程-链的延伸 RNA-DNA杂交区:刚合成出来的RNA链与解开的DNA模板链之间可形成一小段RNA-DNA杂交区。随着核心酶的移动,RNA链不断地延伸,杂交区也往前延伸,但后面的杂交区随着DNA双螺旋的回复,RNA链逐渐被置换出来,因此,杂交区也保持着固定一小段。 二. 原核生物转录 2.转录过程-链的延伸 DNA分子上有终止转录的特殊信号,也是特定的核苷酸序列,称为终止子。 核心酶能识别终止子,停止转录。 这一过程有时需要一种蛋白质 —— ?因子的帮助(当终止信号较弱时);有时不需要(当终止信号较强时)终止区的碱基可形成特殊的结构---回文结构,形成茎环结构和一串寡聚U 。 核心酶释放出RNA,自己也离开DNA。 DNA上的解链区重新形成双螺旋。 二. 原核生物转录 2.转录过程
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