05-09生物高考非选择题--微生物与发酵工程.docVIP

1、苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，所以人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品，请回答下列问题： （1）②中培养目的菌株的选择培养基中应加入??????? 作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基????????? （A.影响；B.不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用????????? 法。 （2）④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于???????? ；使用???????? 法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？ （3）如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？ （4）实验过程中如何防止其它微生物的污染？ 答案 （1）苯酚? A? 平板菌落计数（活菌计数或菌落计数） （2）④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源? 平板分离（稀释涂布平板法或平板划线分离）? 避免培养过程中产生的水分影响微生物的生长。 （3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同的菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚的含量。 （4）培养基灭菌接种环境灭菌，接种过程无菌操作。 解析：本题涉及到有关微生物的培养、接种、筛选及无菌操作等知识点。若从土壤中筛选出只能降解利用苯酚的细菌菌株，则在培养基中只能加入苯酚作为唯一碳源，碳源的浓度将影响细菌的繁殖与数量。接种细菌或获得单菌形成的菌落的常用方法是稀释涂布平板法和平板划线法，接种及培养时要注意无菌操作。要在相同的条件和时间内，用相同的培养基来培养不同的能分解苯酚的菌，以苯酚的分解速度、菌落的形成情况、pH的变化等来衡量不同菌的分解能力。 2、利用纤维素解决能源问题的关键，是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案，并回答相关问题。 【实验目的】比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。 【实验原理】纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小；用呈色反应表示葡萄糖的生成量。 【实验材料】三种微生物（A—C）培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同。 【实验步骤】 （1）取四支试管，分别编号。 （2）在下表各列的一个适当位置，填写相应试剂的体积量，并按表内要求完成相关操作。 试管号 试剂（mL） 1 2 3 4 蒸馏水 1.4 1.4 1.4 ? pH7.5的缓冲液 ? 0.2 0.2 0.2 纤维素悬浮液 0.3 0.3 ? 0.3 微生物A提取液 0.1 ? ? ? 微生物B提取液 ? ? ? ? 微生物C提取液 ? ? 0.1 ? 总体积 2.0 2.0 2.0 2.0 （3）将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时。 （4）在上述四支试管中分别加入__________试剂，摇匀后，进行__________处理。 （5）观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。 【实验结果】 ? 微生物A提取物 微生物B提取物 微生物C提取物 颜色深浅程度 + +++ ++ 【分析讨论】 （1）该实验中的对照组是__________号试管。 （2）实验组试管均呈现的颜色是__________，但深浅不同。 （3）上述结果表明：不同来源的纤维素酶，虽然酶蛋白浓度相同，但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异，其可能原因是_________________________________________。 （4）你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是____________________________。 （5）从解决能源问题的角度，开发这种纤维素酶的意义在于___________________________。 答案 【实验步骤】 （2） 管号 试剂（mL） 1 2 3 4 蒸馏水 ? ? ? 1.5 pH7.5的缓冲液 0.2 ? ? ? 纤维素悬浮液 ? ? 0.3 ? 微生物A提取物 ? ? ? ? 微生物B提取物 ? 0.1 ? ? 微生物C提取物 ? ? ? ? 总体积 ? ? ? ? （4）班氏? 加热（加热至沸腾） 【分析讨论】 （1）4 （2）红黄色 （3）不同酶的氨基酸序列不同（不同酶的空间结构不同） （4）微生物B （5）葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纤维素代替化石能源（言之有理即给分） 解析：考查了对微生物培养实验的分析综合。解决这类题目首先要对题中所给信息了解透彻：纤维素在纤维素酶的作用下分解产物是葡萄糖，用葡萄糖的产生来表示酶活性的大小，用呈色反应表示葡萄糖的生成量。可以用班氏试剂来检测葡萄糖的生成，加热后根据生成红黄色颜色的深浅的来判断葡萄糖的生成量。明确了这几点后，根据实验设计的原则：对照原则、等量原则、单一变量原则等，进行实