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第三节 DNA的修复系统 一、复制修复 1、尿嘧啶糖基酶系统： 能切除进入DNA的尿嘧啶核苷酸。 1、尿嘧啶糖基酶系统的作用过程 i）糖基酶识别错配位点，并制造AP位点。 ii）AP内切酶切除相邻核苷酸。 iii）DNA 聚合酶修补缺口。 iv）DNA 连接酶连接缺口。 U AC AGT TGGTCA glycosylase C AC AGT TGGTCA TGGTCA AC AGT TGGTCA ACCAGT AP endonuclease DNA polymerase DNA ligase 第三节 DNA的修复系统 一、复制修复 1、尿嘧啶糖基酶系统： 能切除进入DNA的尿嘧啶核苷酸。 2、错配修复： 错配修复（mismatch repair） 1. 修复系统 识别错配的碱基对，准确地区分出哪一个碱基是错误的，切除错误碱基，并进行修复 TACGTACGCACG ATGCATGCATGC Which is wrong，A or C？ 2. E. coli中的DNA甲基化酶 dam甲基化酶（ Adenine methylase） 复制 甲基化 新合成的链未甲基化修饰 半甲基化 C T A G 复制 错配 识别 剪切 Polymerase I ligase Methylase 3.修复过程 第三节 DNA的修复系统 一、复制修复 1、尿嘧啶糖基酶系统： 能切除进入DNA的尿嘧啶核苷酸。 2、错配修复： 首先识别母链和有错配的新链；在新链上打开缺口；外切错配片段，填补上正确序列，封闭缺口。 3、无嘌啉（AP）修复： 无嘌啉内切酶（AP内切酶）能切除DNA中无碱基核糖，留下一段单链DNA，然后填补封闭。 二、损伤修复 1、光复活： 是对UV诱发的T-T二聚体。修复发生在320-370nm的蓝光中。 （1）修复酶： 光复活酶（photoreactivation enzyme, PRE） （2）修复机理 PRE被光子激活，直接切断T-T之间的交联键。 二、损伤修复 1、光复活： 光复活酶（PR酶）：修复嘧啶二聚体。 2、甲基转移酶： O6－G→G。（以免O6－G 与T配对） 3、切除修复：核酸内切酶UreABC识别切除损伤DNA片段；DNA聚合酶合成一段新链置换损伤片段，连接酶封闭。 1. 光修复 是对UV诱发的T-T二聚体。修复发生在320-370nm的蓝光中。 1949年Albert Kelner发现的。 （1）修复酶： 光复活酶（photoreactivation enzyme, PRE） （2）修复机理 PRE被光子激活，直接切断T-T之间的交联键。 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P 3、切除修复 是细胞内最重要的修复机制 ，主要由DNA聚合酶Ⅰ和 连接酶完成。 DNA连接酶 ATP E.coli的切除修复机制 i）糖基酶识别错配位点，并制造AP位点。 ii）AP内切酶切除戊糖。 iii）DNA 聚合酶修补缺口。 iv）DNA 连接酶连接缺口。 U AC AGT TGGTCA glycosylase C AC AGT TGGTCA TGGTCA AC AGT TGGTCA ACCAGT AP endonuclease DNA polymerase DNA ligase 3.1 碱基切除修复 （1）识别损伤处 修复T-T dimer导致的结构变形。 内切酶uvrABC识别。 (uvr：Ultraviolet repair) 3.2 核苷酸切除修复（nucleotide excision repair，NER） ①uvrAB识别嘧啶二聚体或其他大的损伤。 ②然后uvrA脱离。 T-T AA T-T AA uvrA uvrB T-T AA uvrC uvrB （3）释放单链片断 uvrD是一种解旋酶，把切开的部位解螺旋，释放出单链片断（约12nt）。 T-T uvrD AA 5’ 3’ uvrC与uvrB结合，并在损伤点两侧（5‘端7nt、3’端3-4nt）切断单链。 （2）切割 （5）连接 DNA ligase连接成完整的链。 AA ligase TT （4）修补 DNA polymerase Ⅰ填补缺口。 AA Pol Ⅰ 三、复制后修复 1、重组修复 2、SOS修复 只有当DNA损伤后才激活SOS修复系统。 SOS系统使复制叉跳过损伤区域继续合成DNA链。 SOS修复中，损伤的模板不能正确复制，而且DNA多聚酶的校正系统放松了对错误核苷酸的识别，所以产生的DNA分子往往是无功能的。故被称为差错倾向修复。 Miroslav Radman首先在切除修复缺陷型菌株中发现的。 1. 重组修复（recombi