《进出口食品中2-氯苯胺残留量的检测方法---液相色谱-质谱质谱法》.docVIP

《液相色谱-质谱/质谱法》编制说明 一、任务来源 液相色谱-质谱/质谱法2009B517。 二、编制依据 本标准的编制按照检验检疫行业标准SN/T0001-1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》（以下简称《基本规定》）和国家质检总局颁发的《残留分析质量控制指南》的要求在参考前人对检测方法研究的基础上，组织有关人员进行了深入研究和室内验证实验，并经、出入境检验检疫局、出入境检验检疫局、、市疾病预防控制中心等5家单位进行了协同验证试验，本方法的各项技术指标均达到《基本规定》的要求。 、编制依据 1、制定本行业标准的意义 氯代芳烃类化合物是一类污染面积广，毒性较大的化合物，广泛存在于纺织、皮革鞣制、干洗废液等工业废水中，且大多具有致畸、致癌、致突变效应。作为环境外来物，天然微生物缺乏降解此类化合物的酶或酶系，通常难以生物降解，持久滞留于环境，并易于生物富集，对生态环境和人体健康构成威胁 []。在美国环保署（EPA）所列的129种优先污染物中氯代芳烃类化合物占25种之多，受到人们的日益关注[]。作为氯代芳烃化合物的一族，氯代苯胺类化合物在杀虫剂、染料和药物等的合成中大量使用，广泛污染环境。另外，除了直接进入自然界的氯代苯胺外，它又是氯代硝基芳烃化合物和除草剂的常见中间代谢产物。据报道，由于物理和化学吸收、土壤及其腐殖质的吸附作用，施用除草剂的土壤在多年后仍有氯代苯胺的存在。随着环境科学的发展和环境质量意识的提高，探索对其进行高效、彻底、清洁的治理技术已势在必行。因此，研究氯代苯胺类化合物的污染成为一项日益受到重视的课题。 2、残留量检测方法的研究现状 氯苯胺的分析方法，已报道的主要有液相-紫外检测器法[]、气相色谱法[]、梯度淋洗离子色谱-安培检测法[]、荧光光度法[]、液相-质谱法[8]。由于氯苯胺无特征紫外吸收，因而液相-紫外检测器法灵敏度不高[]，采用气相色谱法检测这类芳香胺类化合物的研究和应用较多，但是这些方法一般需要较繁琐的衍生化过程。液相-质谱法灵敏度高，选择性好。文献中，有关食品中2-氯苯胺残留量的检测方法报道比较少，较多地报道了环境水中2-氯苯胺的分析方法。 由于在我国苯胺类化合物被列为环境重点污染物，已制定了萘乙二胺偶氮光度法的标准分析方法．但是该方法只能分析总的苯胺类化合物，不能对单个的苯胺类化合物进行定性和定量分析。 本标准在国内外研究的基础上，利用液相色谱-质谱/质谱法的选择性和抗干扰能力较强的特点，采用，浓缩、定容后，用液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，外标法定量，方法方便、稳定，检测限、回收率和精密度均符合《基本规定》和《残留分析质量控制指南》的要求。、实验条件的选择o-chloroaniline CAS号：95-51-2 图1 2-氯苯胺的分子结构 分子式：C6H6ClN 相对分子量：127.57 溶解性：不溶于水，溶于乙醇、乙醚。、提取和净化的选择 本文涉及基体，通过比较甲醇、乙腈、乙酸乙酯、乙醇的提取效果，结果发现乙腈的提取效果，，选乙腈。净化的选择：1％，3％，5％和10％不同浓度氨水-甲醇溶液的洗脱效率，发现采用5％氨水甲醇的洗脱效率最高，而且洗脱下来的杂质较少。因此选择了%氨化甲醇作为洗脱剂。、色谱分离条件研究 通过对Waters C18柱、Agilent C18柱、NUCLEODUR C18柱在液相上对出峰效果比较，实验表明，用Waters C18柱峰形尖锐，用Agilent C18柱、NUCLEODUR C18柱分离度较好，NUCLEODUR C18柱在液质上出峰时间合适NUCLEODUR C18柱。 考查了8种流动相：0.1%甲酸水-乙腈（50:50），水-乙腈（50:50），0.1%甲酸水-甲醇水-甲醇（50:50），10mmol乙酸铵-甲醇，10mmol乙酸铵-乙腈，1%乙酸-乙腈，1%乙酸-甲醇对，结果表明，乙酸水(1%)-甲醇(50:50)、乙酸水(1%)-乙腈(50:50)，0.1%甲酸水-乙腈（50：50）比较好，乙酸(1%)-甲醇灵敏度比较低，而且使用甲醇为流动相柱压较高乙酸水(1%)-乙腈、0.1%甲酸水-乙腈，选择0.1%甲酸水-乙腈（50：50）。 、质谱测定条件研究 首先采用mg/L的待测化合物的标准溶液以注射的方式在离子模式进行母离子全扫描，确定的分子离子，然后以分子离子为母离子，对其子离子进行全扫描（图）见表2气帘气（CUR）（）（TEM）CUR：：μA；TEM： ℃。 表的主要参考质谱参数 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 驻留时间(ms) DPEP （V） CE (eV) CXP （V） 2-氯苯胺 128.2 92.0 100 80 10 24