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第15章蛋白质的生物合成翻译2
原核生物 真核生物 核糖体 70S(30S、50S) 80S(40S、60S) 起始tRNA fMet-tRNAfmet Met-tRNA 起始信号 多个起始密码子AUG,上游有SD序列,翻译几种多肽。 只有一个AUG密码子,每种mRNA只转译出一种多肽。 相关因子 起始因子、延伸因子、终止因子均为3种 9种起始因子、3种延伸因子、1种终止因子 转录翻译偶联,mRNA不需加工 转录翻译偶联 转录翻译不偶联,mRNA需加工 抑制剂 氯霉素、链霉素等 环己亚胺、白喉素等 合成速度 快 慢 原核和真核生物蛋白质合成差异 三、翻译后的加工修饰 从核糖体释放的多肽链,不一定具备生物活性。肽链从核糖体释放后,经过细胞内各种修饰处理过程,成为有活性的成熟蛋白质,称为翻译后加工。 修饰:蛋白质的N末端、侧链等的加工。 折叠:一级结构形成高级结构,发生在 肽链刚合成时,边合成边折叠。 定位:蛋白质到达细胞目的地。 降解:防止异常或不需要的蛋白质积累, 加速氨基酸的循环。 加工包括: 1. 修 饰 N端修饰 原核生物修饰时是由肽甲酰基酶除去甲酰基,多数情况甲硫氨酸也被氨肽酶除去,真核生物中甲硫氨酸则全部被切除。 多肽链的水解切除 水解切除其中多余的肽段,使之折叠成为有活性的酶或蛋白质。如酶原激活。 氨基酸侧链的修饰 氨基酸侧链的修饰包括羟化、羧化、甲基化及二硫链的形成等。 糖基化修饰 糖蛋白是细胞蛋白质组成的重要成分。它是在翻译后的肽链上以共价键与单糖或寡聚糖连接而成。糖基化是在酶催化下进行的。 ① 酶 二硫键异构酶:促进二硫键的形成。 肽酰脯氨酰顺反异构酶:促进肽-脯氨酰肽键的旋转,与新生肽链形成密切相关,加速蛋白质的折叠。 2. 蛋白质的折叠 能够帮助新生肽链正确组装、成熟, 自身不产生终产物的蛋白质,具有酶的 特征,如热休克蛋白。 ② 分子伴侣(molecular chaperone) 思考题 1. 遗传密码、密码子、同义密码子、摆动假说、SD序列。 2. 蛋白质的翻译系统包含哪些组分?其中三种RNA各有怎样的功能? 3. 遗传密码具有哪些特点?tRNA具有怎样的结构以保证其在蛋白质的翻译中作为“解码器”? 4. 简述蛋白质的翻译过程。 * * 二、蛋白质生物合成的过程 氨基酸的活化 蛋白质合成的起始 肽链的延伸 合成终止 分为四个阶段: 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP+PPi 氨酰-tRNA合成酶 氨基酰-tRNA合成 (aminoacyl-tRNA synthetase) 1. 氨基酸的活化 氨基酸的羧基与tRNA 的3’端CCA-OH以酯键相连,因此其氨基是自由的。 第一步反应 氨基酸 +ATP+E→ 氨基酰-AMP-E + PPi 氨基酰-tRNA合成酶 第二步反应 氨基酰-AMP-E + tRNA ↓ 氨基酰-tRNA + AMP + E 氨基酰-tRNA表示方法:Ser-tRNASer 氨基酰-tRNA合成酶具有高度特异性,能够专一识别底物氨基酸和tRNA,保证了翻译的准确无误。 催化氨基酰-tRNA脱酰基,具有校正活化过程中可能发生的错误 。 氨基酰-tRNA合成酶的特点 密码子-反密码子的相互作用 氨基酸的加入需靠mRNA上的密码子和tRNA上的反密码子相互以碱基配对辨认。 密码子的第一个碱基与反义密码子的第三位配对。 摆动假说:密码子的前两个碱基严格遵守碱基配对规律为tRNA的反密码子识别(编码的特异性),他们中的任何不同即为不同tRNA识别,但第三个碱基不同,与反密码子上相应碱基结合很松(利于tRNA迅速解离) ,有一定的自由度,即摆动性。 反密码子 3’- X’-Y’-Z’-5’ 密码子 5’- X- Y-Z - 3’ 密码子、反密码子配对的摆动现象 反密码子 第一位碱基 密码子 第三位碱基 I U G C A A,C,U A,G U,C G U 密码子 反密码子 大肠杆菌中, 起始密码子AUG所编码的氨基酸并不是甲硫氨酸本身, 而是甲酰甲硫氨酸(fMet)。 Met-tRNA + N10-甲酰FH4
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