以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞_杨俊林幻灯片.pdfVIP

以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞_杨俊林幻灯片.pdf

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现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine 2009 Vol.9 No.16 3001 · · ·基础研究· 以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞* 杨俊林 刘雄昊 喻姣玲 冯 劢 谭 杨 李 卓 吴 奔 高 庭 潘 盛 邬玲仟 梁德生 夏家辉 (中南大学医学遗传学国家重点实验室湖南长沙410078) human dermal fibroblasts, HDFs (Mouse embryonic fibroblasts, MEFs) 摘要 目的:比较人皮肤成纤维细胞( )与小鼠胚胎成纤维细胞 human embryonic stem cells, hESCs 的增殖能力及研究人皮肤成纤维细胞作为饲养层支持人胚胎干细胞( )未分化生长的能力。方 法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出HDFs ,通过细胞形态的观察和生长曲线的绘制比较HDFs 与MEFs 的体外增殖能力。将 HDFs hESCs 12 hESCs (AKP) 作为饲养层细胞与 共培养,传代 代后,检测 碱性磷酸酶 、表面特异性标志及胚胎干细胞特异性转录 HDFs 15 10 HDFs MEFs 4 hESCs 因子。结果: 可连续传代培养 代以上, 代以下的 增殖迅速,而 自第 代起,增殖能力就明显下降; HDFs 12 hESCs 在 饲养层上可传代培养 代以上,克隆边界清晰,细胞排列紧密,碱性磷酸酶、表面标志物检测均呈阳性,表达了 HDFs MEFs HDFs hESCs 特异性转录因子。结论: 比 具有更强的增殖能力; 可作为培养 的饲养层细胞。 关键词:人胚胎干细胞;人皮肤成纤维细胞;饲养层细胞 R329.2 A 1673-6273 2009 16-3001-05 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) Culture of human embryonic cells by using human dermal fibroblasts as feeder cells* YANG Jun -lin, LIU Xiong -hao, YU Jiao-ling, FENG Mai, TAN Yang, LI Zhuo, WU Ben, GAO Ting, PAN Sheng, WU Ling -qian, LIANG De-sheng, XIA Ji

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