糖代谢的中心途径—培训课件.ppt

脂肪的分解：微生物对脂肪的分解主要依赖于脂肪酶的作用，产生甘油和脂肪酸。在有氧条件下，脂肪酸可被彻底氧化成乙酰辅酶A，并释放出大量能量。 蛋白质的分解：蛋白质是由氨基酸组成的大分子量的化合物，种类繁多。微生物中产生的蛋白酶可将蛋白质分解为片段较小的肽，然后再由肽酶将肽分解成为氨基酸。微生物产生的蛋白酶大多数可以分泌到细胞外面，称为胞外酶，但肽酶有胞外酶，也有不向外分泌而只存在于细胞内的胞内酶。微生物也能分解组成蛋白质的氨基酸，形成胺类和醇类。 柠檬酸(Citric?acid)分子式为C6H807，易溶于水、酒精、不溶于醚、酯、氯仿等有机溶剂，它天然存在于果实中。柠檬酸主要用作酸味剂、增溶剂、缓冲剂、抗氧化剂、除腥脱臭剂、风味增进剂、胶凝剂、调色剂等。柠檬酸1784年由Scheels发现，1893年Wehmer发现二种青霉菌可以生成柠檬酸，1917年Currie使用黑曲霉浅盘发酵生产柠檬酸，1938年Perquin和1942年Karrow进行了柠檬酸的深层发酵研究，1951年美国Miles公司首先以淀粉质为原料，经水解后深层发酵大规模生产柠檬酸。 第三节 有机酸发酵 一、柠檬酸发酵(酶学水平的调控) 我国1953年采用浅盘法发酵生产柠檬酸，1968年用薯干为原料采用深层发酵法生产柠檬酸成功，至20世纪70年代中期，柠檬酸工业已初步形成了生产体系：产量位居世界第一；技术上处于世界领先水平，其优势： 1.发酵采用的菌种(黑曲霉)具有双重功能，采用边糖化边发酵工艺，降低了生产成本。 2.柠檬酸的产酸速度大大高于国外水平，平均产酸速率是国外的2倍。 （一）柠檬酸发酵概述 柠檬酸的消费领域： 饮料行业占40～45％ 食品添加剂等占15～20％ 洗涤剂占20～30％ 医药占5％ 其它占10％ 我国是世界上最大的柠檬酸生产和出口国，柠檬酸年产能已经达到百万吨，占世界的70％左右；年产量达70余万吨，约占世界的65％；年出口量50万吨，超过世界贸易总量的一半。主要出口到印度、美国、欧洲、日本等地。在1970年时，我国的柠檬酸年产仅有130吨。 （二）柠檬酸发酵微生物? 在固体培养基上，黑曲霉菌落由白色逐渐变至棕色。孢子区域为黑色，菌落呈绒毛状，边缘不整齐。菌丝有隔膜和分枝，是多细胞的菌丝体，无色或有色，有足细胞，顶囊生成一层或两层小梗，小梗顶端产生一串串分生孢子。 1.黑曲霉(Aspergillus?niger)的形态特征? 目前生产上常用产酸能力强的黑曲霉作为生产菌。 黑曲霉生产菌可在薯干粉、玉米粉、可溶性淀粉糖蜜、葡萄糖麦芽糖、糊精、乳糖等培养基上生长产酸。 生长最适pH 因菌种而异，一般为pH3~7；产酸最适pH为1.8~2.5。 生长最适温度为33-37℃，产酸最适温度在28-37℃，温度过高易形成杂酸。 斜面培养： (4°Be′)的麦芽汁培养基。 2. 产柠檬酸黑曲霉的生理特征? （三）柠檬酸发酵机理 ①在有高浓度草酰乙酸(OAA)的情况下对Ac~CoA 具有高度亲和力的组成型的柠檬酸合成酶(CS)的存在；②催化丙酮酸(pyr)固定CO2生成草酰乙酸反应的高水平的组成型的丙酮酸羧化酶(PC)的存在； ③在缺少锰的条件下，蛋白质分解或蛋白质合成受阻造成的铵的高浓度能解除柠檬酸(citr)对磷酸果糖激酶(PFK)的抑制。④柠檬酸的分泌，降低其胞内浓度。 1.高水平的柠檬酸合成能力由3个因素构成 这能力由两个因素构成： ① 低水平的α-酮戊二酸脱氢酶(KGD)影响TCA环运行的畅通程度，使TCA环前半部的中间产物积压； ② 在锰缺乏的条件下，顺乌头酸酶(AE)和异柠檬酸脱氢酶(ID)的活性降低，从而使柠檬酸的累积比其它几种酸(顺乌头酸、异柠檬酸和α-酮戊二酸)更明显。 2.较低的柠檬酸降解能力 在柠檬酸过量合成阶段，培养基的 pH 值会影响细胞膜对目的产物柠檬酸的跨膜输送；柠檬酸的分泌也会影响培养基的pH值。锰与铁的缺乏有利于柠檬酸的排出。 3. 柠檬酸输出能力 Mn+ 缺乏如何会使NH4+浓度升高呢？ 当培养基中Mn+缺乏时，NH4+浓度升高，同时微生物体内积累几种氨基酸(Glu、Arg、Gln等)，这些氨基酸的积累，意味着体内蛋白质的合成受阻，而外源蛋白质的分解速度则不受到影响，这样NH4+的消耗下降，NH4+浓度就会升高。 柠檬酸产生菌可在有氧的条件下大量生成柠檬酸，也就是说，NADH即被氧化了，又不过量积累ATP。 为了解释这种现象，有人提出了一种假设：该菌体内存在一条侧系呼吸链，NAD(P)