丹酚酸B对脑缺血小鼠脑组织能量代谢变化影响.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 脑卒中是当前老年人致残致痴的主要原因之一，据WHO公布的资料，在57个国家中， 有40个国家把卒中的死亡率列入了前三位，其中在日本和中国卒中的死亡率已占首位。 而缺血性脑卒中占脑卒中病人总数的60％一70％。探讨缺血后脑组织不同程度的损伤和防治 已经成为医学界研究的热门。 缺血性脑卒中，属于中医缺血性“中风”的范畴，中医认为，中风主要是由“风、火、 痰、湿、瘀”五大主因引起。其中，痰瘀阻滞引起脑组织缺血是一类重要原因，而现代 医家更是将中风的致病因素归为“毒邪”致病。西医认为缺血性中风是由于脂质代谢障 碍如高血脂和高血黏度形成脑动脉粥样硬化，导致血栓形成，从而引起脑栓塞，造成血 液循环障碍形成部分脑组织缺血、水肿等病理变化，导致神经功能障碍，出现一系列中 风病的表现。因此研究脑缺血早期脑组织损伤的病理生理机制对于有效防治缺血性脑中 风有着重要的临床意义。缺血性脑损伤的病变机制十分复杂，而能量代谢障碍被认为是 缺血性神经细胞损伤较早的使动因素。主要表现在线粒体形态结构及功能的改变，高能 磷酸化合物ATP的耗竭，由此导致能量依赖的离子泵功能的改变、兴奋性氨基酸的生成 增多，脑组织水肿，最终导致神经原的坏死。 丹参是唇形科植物丹参SalviamiitiorrhizaBunge的根，它的主要功效有祛瘀止痛， 活血通经，清心除烦，用于月经不调，经闭痛经，瘸瘕积聚，胸腹刺痛，疮疡肿痛，心 烦不眠，肝脾肿大，心绞痛。而它的活血化瘀功效更是被用于心脑缺血疾病的预防和治 疗。近几十年来，采用现代医学方法，结合化学，分子生物学和细胞生物学等多学科的 技术手段，对丹参进行了较系统的研究，取得了大量新的实验结果和认识，并开发出一 系列疗效好的临床应用药物。丹参水溶性有效成分，特别是丹酚酸类化合物，受到医学 家的极大重视。它在丹参中含量高活性大且可以通过血脑屏障，是治疗脑缺血理想的药 物。以往实验研究表明，丹酚酸g(SalB)有很强的的抗脂质过氧化和清除自由基的作用 以及降低血液黏稠度的作用。本实验复制低血压小鼠脑缺血模型，观察SaIB对缺血所致 脑组织能量代谢障碍的影响。 本论文由文献综述和实验研究两部分组成。 综述1主要介绍缺血性脑损伤能量代谢障碍的研究进展，其中包括脑组织正常的能量 代谢，脑缺血后线粒体功能以及能量代谢障碍导致脑组织损伤病理生理的机制，同时介 绍了中医药对脑缺血后能量代谢障碍引起的脑组织损伤治疗的现代研究进展。 综述2详细介绍了中药单体丹酚酸B对脑缺血治疗作用的实验研究进展，包括其抗 氧化作用、对血液流变学的改变及对物质代谢等方面的作用。 以上两篇综述为SalB对脑缺血小鼠脑能量代谢变化的影响的实验研究提供了理论基 础和实验资料。 实验研究分三部分： 实验一观察SalB对脑缺血小鼠脑组织含水量和形态的变化。将NIH小鼠随机分为： ! 墨堕墼里型堕箜堡尘垦壁望堡堕墨!!塑壅丝堕墅堕 Nim)对照组，每组 假手术组、脑缺血模型组、Sa[B治疗组和尼莫地平(Nimodipine， 又分为三个时间点(缺血lO、20、30min)。结扎小鼠双侧颈总动脉的同时腹腔注射硝普 纳降压复制急性脑缺血模型，分别测量脑组织干湿重，根据公式计算脑组织含水量，通 过HE染色观察脑组织形态学的改变。 实验二观察SalB对脑缺血小鼠脑能量代谢的影响。模型复制和动物分组同实验一， performanceLiquid 应用流式细胞仪(flowcytometry，FCM)、高效液相仪(High potential，MMP)、 实验三观察SalB对脑缺血小鼠脑组织氨基酸含量的影响。模型复制和动物分组同实 验一，应用HPLC检测小鼠脑组织兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)和抑制 性氨基酸v一氨基丁酸(GABA)含量的变化。 实验结果 一、Sal8对脑缺血小鼠脑组织的影响 1．SalB对脑缺血小鼠脑组织含水量的影响 与假手术组比较，缺血lOmin时脑组织含水量开始逐渐增多，但差异不显著，至缺血 30rain脑组织含